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柱花草AFLP反应体系的建立与引物筛选
年 月 第 卷第 期
20144 热 带 农 业 科 学 34 4
Apr． 2014 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTURE Vol．34, No．4
柱花草AFLP 反应体系的建立与引物筛选①
,2)② ) )
韩蓉蓉1 曾黎琼2 史亮涛3
) ) )③ )
刘国道4 何光熊3 文亦芾1 金 杰3
( 云 南农业大学动物科学技术学院 云南昆明 ；
1 650201
2 云 南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/ 云 南省农业生物技术重点实验室/
农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室 云南昆明 650223 ；
3 云 南省农业科学院热区生态农业研究所 云南元谋 651300 ；
4 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 海南儋州 571737)
摘 要 以柱花草奥克雷品种为材料 采用改良的 法提取基因组 对影响 反应体系的主要因素进
CTAB DNA AFLP
， ，
行了优化 建立了柱花草的 反应体系 结果表明 为最佳反应体系 酶切体系中 模板量为
， AFLP 。 ： 20L ， DNA 1000ng
μ ，
用 5 酶切 2 5 酶切2 效果最佳 分别取5 L酶切液 1L 连接酶( 1 L
U RI37℃ h U I65℃ h ； 、 T4 5 L/L)
Eco 、 Mse μ μ μ 、 μ
接头 接头 缓冲液 酶自带 于 下连接 效果最佳 预扩增体系中模
I min
R 、 1 L I 、 2 L (T4DNA) 22℃ 10 ；
Eco μ Mse μ ，
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