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羊种布鲁氏菌Omp10基因的克隆及原核表达
· · 生物技术 中国畜牧兽医 年第 卷第 期
2014 41 12
122
羊种布鲁氏菌 基因的克隆及原核表达
Om 10
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徐开莲 朱华培 赵天靖 贾晓晓 郭莳雨 庞峰 焦寒伟
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成鹰 杜丽 史巧芸 荣辉 张珈宁 王凤阳
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海南大学农学院 海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室 海口市动物基因工程重点实验室 海南海口 570228
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摘要 根据 公布的羊布鲁氏菌 株外膜蛋白 基因序列 设计
GenBank B.melitensis M5 90 outermembrane roteinOm
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对引物 以其全基因组为模板 采用 技术对其进行扩增 得到 的目的片段 连接入 载体 转化
1 PCR 381b MD20 T E.coli
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感受态细胞 测序正确后 构建 原核表达质粒 再将该质粒转化入 诱导表达
DH5 ET 28aOm 10 E.coliBL21 DE3 IPTG
α p - - p
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融合蛋白 用 和 进行分析 结果表明 成功构建了含 基因的原核表达载体
HisOm 10 SDSPAGE Western blottin Om 10
- p - g p
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