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实验十三 动物驱虫及寄生虫学剖检试验
一、实验目的和要求
通过实验,掌握动物驱虫和寄生虫学剖检的方法,掌握寄生虫的感染率、感染强度、药物的驱虫率、驱净率等概念;了解寄生虫虫体标本的采集、固定和保存的基本方法。
二、实验材料与器材
1、实验动物:散养的鸡、鸭或鹅(从农村农户收购)10只。
2、实验药物:咪唑类药物原粉2g。
3、笼具与饲料:笼具一套,饲料25kg。
4、试剂:饱和食盐水500mL、福尔马林250mL、70﹪酒精250mL。巴氏液:福尔马林30g、食盐7.5g、水1000毫升。甘油酒精:70﹪酒精95毫升、甘油5毫升。贝氏液:蒸馏水35毫升、甘油20毫升、水合氯醛20克、糖浆3毫升、阿拉伯胶20克、酸性复红液10多滴,顺序混合溶解后加热浓缩到胶状。
5、仪器:显微镜每人一架、放大镜每人一个。
6、其它器材:白搪瓷盆、载玻片与盖玻片,镊子、普通剪刀和肠剪各1把,不锈钢盆2只,40目网筛2只,培养皿5付,挑虫针5根,标本瓶2只,100mL烧杯2只,棉线若干,标签纸2张。
以上动物、器械每组1套。
三、实验方法和步骤
(一)动物驱虫
1、实验动物的选择与分组:购买消瘦、生长缓慢、未经驱虫的农户散养鸡(或鸭和鹅),用饱和食盐水漂浮法逐羽粪检及用麦克马斯特氏法虫卵计数得出EPG,根据感染虫种和强度,分驱虫组和对照组。
2、药物称取、投服和临床观察:逐羽称重,按选定药物的规定剂量称取药物,逐只投服。投药后每天观察鸡的精神、食欲、排粪等情况,并在用药后每天收集各试验组的粪便,以水洗沉淀法处理后再找出排出的虫体并计数,直至停止排虫,以了解排出的情况和排虫高峰。给药后8天,按寄生虫学剖检法找虫。
(二)寄生虫学剖检
1、体表与血液检查
在动物扑杀后,首先制作血片,染色检查。然后仔细检查体表,观察有无体表寄生虫。
2、皮肤、皮下组织、眼睛、天然孔的检查
家禽拔除羽毛,检查皮肤表面,遇到肿胀、包囊时应作专门检查,主要检查皮下有无鸟龙线虫(水禽)。检查眼和结膜腔,有无嗜眼吸虫、孟氏尖旋线虫等感染。(哺乳动物剥皮,检查皮下有无龙线虫、牛皮蝇蛆、牛丝虫等)
3、胸腔和腹腔的打开、
打开体腔,用水将羽毛浸湿,拔除胸、颈部位羽毛,切开大腿与腹部相连的皮肤,用力将大腿向外翻压直至髋关节脱臼,使尸体背卧平放于瓷盘上,剪开颈部皮肤、腹部皮肤并打开胸腔和腹腔。打开胸腔和腹腔时,从剑状软骨的后缘煎一小口,分别向两侧向前沿肋骨和肋软骨的交界处剪开并向前掰断胸骨,然后沿小口向后打开腹腔,打开胸腔和腹腔注意勿剪破内部脏器如肝脏、肠道等。并分别剥离和摘出全部的消化器官、呼吸器官、泌尿生殖器官、法氏囊、心脏及较大的血管(哺乳动物)。哺乳动物的胸腔和腹腔打开后还要收集胸水与腹水,沉淀后观察有无寄生虫。
4、内脏器官的检查
内脏器官实质分两类,一类是腔道器官如胃、肠等,检查时候在水中剪开,将内容物洗入水中,对黏膜仔细检查,对洗下的内容物则反复加水沉淀,等液体澄清后取沉淀检查。另一类是实质器官如肝脏、肺脏等,则首先在温水中用手撕碎挤压,取液体反复沉淀检查。
(1)呼吸系统
用剪刀剪开鼻腔、喉头、气管,先用肉眼观察,然后刮取黏液以扩大镜检查对于家禽,主要检查气管和喉头有无舟形嗜气管吸虫和比翼线虫,羊则检查有无狂蝇蛆,肺为实质器官,检查方法与肝脏等实质器官相同,具体方法见消化系统部分,家禽肺脏可以不检查,哺乳动物的肺脏主要检查有无肺吸虫或肺线虫。
(2)消化系统
首先将消化到附着的肝脏、胰腺取出,家禽主要检查肝脏的胆囊,将胆囊剪开,检查有无次睾吸虫,其肝脏、胰腺可以不检查。对于哺乳动物的肝脏和胰腺,首先在水中打开胆管或胰管,检查其中有无虫体,然后在水中将组织撕成小块,并用手挤压,而后去除小块组织,将液体倒入铜筛中冲洗,而后倒扣于不锈钢盆中,加水,反复洗涤,然后用培养皿舀出检查虫体。
消化道的检查首先将各段消化道分段取出,如家禽分食道、嗉囊、腺胃和肌胃、小肠、盲肠和直肠等,将食道、嗉囊、腺胃、肌胃、小肠、盲肠与直肠以及肝脏和胰脏分别结扎剥离,分别置于各个容器内。管腔器官的检查方法基本相同,首先在水中用剪刀打开管腔,用拇指将内容物刮到水中,倒入铜筛中冲洗,而后倒扣于不锈钢盆中,加水,再倒扣于不锈钢盆中,反复洗涤,最后用培养皿舀出检查虫体,注意绦虫应该连同肠壁一起剪下,以免头节断裂,影响虫体鉴定。嗉囊和肌胃有内容物应先倒去内容物。对于家禽,一般来说,消化道的虫体种类和数量均较多,如食道和嗉囊中毛细线虫较多,腺胃和肌胃中华首线虫、四棱线虫和裂口线虫较多,小肠中蛔虫、吸虫和各种绦虫等,盲肠与直肠有吸虫和线虫等。
(3)生殖系统
主要检查家禽输卵管有无前殖吸虫,方法同肠管的检查。家畜如牛怀疑胎儿毛滴虫或马媾疫应刮下生殖道黏膜或分泌物,涂片染色后镜检,检查方法参考实验十的附录部分。家禽法氏
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