微生物检验教学课件（扬州大学）第二节 结核分支杆菌的检验.pptVIP

一般特性 G＋杆菌，偶有分支，抗酸染色； 需氧，营养要求特殊，生长大多缓慢； 致病多为慢性 病变，常有肉芽肿； 无鞭毛、无芽胞、无荚膜，不产生外毒素或内毒素，其致病性与菌体成分有关； 分类： 分支杆菌属主要有3种： 结核分支杆菌（M.tuberculosis） 牛分支杆菌（M.bovis） 禽分支杆菌（M.avium） 一、形态染色 1.形态细长,着色不匀,排列成分枝索状 2.抗酸性染色（结核杆菌为红色，其他细菌为蓝色）。 禽分支杆菌 结核分支杆菌 禽分支杆菌 结核分支杆菌 牛型结核杆菌 二、培养特性 1. 营养要求高； 2. 需氧，加6%?8% CO2可促进生长； 3. 生长缓慢。 三、抵抗力 1.强的方面: 抗干燥；抗酸、碱或染料； 抗一般化学试剂。 2.弱的方面: 怕热、怕酒精、怕阳光。 四、致病性 1. 感染途径 (1)呼吸道为主 (2)消化道 (3)破损皮肤粘膜 2. 致病作用 (1) 在细胞内寄生且顽强增殖 (2) 菌体成分致病：脂类、蛋白质和多糖质脂类，含量愈高毒力愈强。 3. 可通过呼吸道、消化或皮肤损伤侵入易感机体, 其中肺结核为最多。 五、免疫性 1.以细胞免疫为主,与变态反应同时存在。 2.传染性免疫(带菌免疫)。 六、微生物学检验 标本的采集 根据病变部位的不同，可采取痰、胸腹水、尿、脑脊液、粪、分泌物及组织等。痰最好是清晨第一口痰，尿为清晨中、后段。 标本的处理 用4 %的硫酸或3 %的盐酸处理20 min或4 %氢氧化钠30 min。 痰,尿,脑脊液,粪便等，直接涂片，萋-尼二氏染色法。 抗酸性细菌能抵抗含酸酒精脱色作用，而染为红色， 非抗酸性细菌和组织细胞被盐酸酒精脱色，美蓝复染成蓝色 。 分离培养：初次分离常用潘曲吉尼氏培养基、青霉素血液琼脂等。初次培养的可疑菌落（抗酸染色阳性）移植于改良Herrold培养基上进行传代。结核分枝杆菌一般生长较慢，需2~4周才能发育好，菌落呈干燥、不规则、坚硬表面呈粗糙的颗粒状 。 动物试验：豚鼠腹腔或皮下接种0.5 ml，经2~3周局部淋巴结肿大、变硬，逐渐变成溃疡，有脓性排出物，始终不愈合。5~6 周后病变扩展至全身，动物因衰弱而死。全身淋巴结、肝、脾、肺均有弥漫性结核结节。 变态反应诊断法：我国常用皮内法和点眼法，可检出95~98 %的结核病牛。 七、防治原则 1、防——接种卡介苗 （1月龄免疫，20 天产生抗体，可维持1~1.5 年）。 2、治——抗结核药, 联合用药。 链霉素，利福平, 环丝霉素等。 患者休息，增加营养，供给新鲜空气， 补充维生素A、C、D等。 * 第二节 结核分支杆菌的检验（Mycobacterium） 结核杆菌是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官, 以肺结核为最多见。 较快 最慢 居中 生长速度 在陈旧培养基或干酪变性病变组织，菌体可见分支。 病灶组织中，菌形比较一致，单个，成双，间或成丛。无荚膜，无芽胞。 家兔 豚鼠 家禽 牛 人 - ++++ ++++ ++++ ++++ - ++++ - - + ++++ + 42℃发育 甘油促进生长 烟酸形成性 尿素酶 硝酸盐还原 含大量类脂和蜡质成分，抵抗力较强，干痰中可存活6~8个月； 对湿热抵抗力弱(60℃30min)，对低温抵抗力强，射线可影响其活力（阳光直射4h可杀灭）。 一般消毒剂对其杀菌力不大，链霉素、环丝氨酸、异烟肼、对氨水杨酸、利福平为常用药。 抵抗力 具有单独的抗原结构 具有相同的抗原性 抗原性 + - + - - + - + + - - + + - - 专性需氧，营养要求严格，最适pH6.5~6.8，最适温度37~37.5℃，在含有鸡蛋、血清、牛乳、马铃薯和甘油（牛型菌除外）易于生长。1~2周开始生长，3~4周才能旺盛发育。 培养特性 具有多形性，可呈杆状、 球菌状、链球状。 比结核分支杆菌 短而粗 细长、正直或微弯杆菌， 长1.5~4um,宽0.2~0.6um 形态染色 革兰氏染色阳性；抗酸染色阳性（结合杆菌为红色，其他细菌为蓝色） 染色 - ++++ ++++ 致病性 禽分支杆菌 牛分支杆菌 结核分支杆菌 肺结核 (TEM x48,185) M.?bovis BCG 肺结核——肺组织 慢性纤维空洞性肺结核 干酪样肺炎 粟粒性肺结核 *