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微生物学-7-7-7微生物的遗传变异和育种
几种常用菌种保藏方法的比较 菌 连续在培养基上(内)移种 种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上(内)移种 保 固体斜面 藏 湿法 半固体琼脂柱 方 休眠态 液体介质(蒸馏水、糖液、其它溶液) 法 干法 藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上 3.菌种保藏的方法 3、方法:①低温保藏法方法:菌种管置4℃冰箱保藏,定时传代 原理:低温下,微生物代谢强度明显下降 。②石蜡油低温保藏法:橡皮塞取代棉塞、加石蜡油。 ③干燥保藏法 将菌种置于土壤、细纱、滤纸、硅胶等干燥材料上保藏。如砂土管法,适用于放线菌、芽孢菌和某些真菌保藏,保藏时间几至几十年。 * 第八章 微生物的遗传变异和育种 (1)遗传型: 又称基因型,指某一生物个体所含有的全部遗传 因子即基因组所携带的遗传信息。 (2)表型:指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特性的 总和,是其遗传型在合适环境条件下通过代谢和发育而得到的具 体体现。 遗传型+环境条件 表型 (3)变异:生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。 (4)饰变:一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 特点:每一个体都发生变化;性状变化幅度小;因其遗传物质未变 饰变不遗传;性状变化的幅度小。 第一节 遗传变异的物质基础 一、3个经典实验 (一)细菌经典转化实验 转化:受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状。 经典转化实验 对各种生化组分进行转化试验 (二)噬菌体感染实验 (三)植物病毒的重建实验 第二节 基因突变和诱变育种 一、基因突变 是变异的一类,泛指细胞内(或病毒粒类)遗传物质的分子结构 或数量突然发生的可遗传的变化,可自发或诱导产生。 野生型菌株:从自然界分离到的菌株。 突变株:野生型菌株突变后形成的带有新性状的菌株。 (一)突变类型 (三)基因突变的特点 (1)自发性:指可自发地产生突变 (2)不对应性:突变性状与引起突变的原因之间无直接对 应关系 (3)稀有性:自发突变的几率很低,在10-6~10-9间 (4)独立性:某基因的突变率不受它种基因突变率的影响 (5)可诱变性:通过物理或化学因子的处理,可大大提高突变率 (6)稳定性:突变后的新性状是可遗传的,稳定的 (7)可逆性:野生型菌株发生突变后,也能发生回复突变。 (四)基因突变自发性和不对应性的实验证明 1、变量试验(fluctuation test) 噬菌体平板 2、涂布试验(Newcombe experiment) 3、影印平板试验(replica plating) 二、突变与育种 微生物育种的目的是人为地使某种代谢产物过量积累,最大程度 降低成本,把生物合成的途径 朝人们所希望的方向引导,最终获 得高产、优质和低耗的菌种。 微生物育种所经历的大致历程: 从生产中选育或定向培育选育(未采用诱变剂,自发突变株)—— 采用诱变剂进行诱变,提高突变频率,筛选有用菌株——利用接合 、原生质体融合等技术使基因发生重组(细胞水平)——体外DNA 重组技术(基因工程技术)创造具有新的生物性状的生物 (一)自发突变及育种 主要是通过实践经验选择生产中发生自发突变的菌株或不断转接 微生物菌株以期获得其自发突变菌株。 特点:费时、费力,工作被动,守株待兔式的 例:卡介苗的筛选,连续接种230代 1、诱变育种的基本环节 2、诱变育种的几个原则 (1)选择简便有效的诱变剂 物理诱变剂:紫外线 化学诱变剂:烷化剂、碱基类似物 (2)挑选优良的出发菌株:仅凭经验 (3)处理单细胞或单孢子悬液:如霉菌或放线菌的分生孢子或细 菌的芽孢 表型延迟定义见教材P211 (4)选用合适的诱变剂量 紫外线剂量:强度与作用时间之乘积 化学诱变剂剂量:浓度与处理时间来表示 (5)充分利用复合处理的协同效应 (6)利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 (7)设计高效筛选方案 (8)创造新型筛选方法 3、3类突变株的筛选 (1)产量突变株的筛选 (2)抗药性突变株的筛选 异烟肼是一种抗代谢药物,能阻止敏感菌的生长,而吡哆醇是异 烟肼的结构类似物,不能阻止敏感菌的生长,当敏感菌能在含
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