格尔德霉素高产菌株的抗性筛选及其发酵的研究.pdf

中国抗生素杂志2014年2月第39卷第2期 文章编号：1001—8689(2014)02—0106—04 格尔德霉素高产菌株的抗性筛选及其发酵的研究 朱皖宜 陈华 邱海潇 罗红瑜 郑玲辉 王玲萍 陶正利 白骅 (浙江省抗真菌药物重点实验室，浙江海正药业股份有限公司，台州 318000) 摘要：目的 用实验室保藏的格尔德霉素产生菌Streptomycesmelanosporofaciens101，通过抗性选育，获得高产突变株。 并研究该菌株的工业化发酵工艺。方法 经硫酸二乙酯诱变和添加代谢终产物(格尔德霉素)抗性筛选，格尔德霉素抗性浓度从 5gL／提高~OlOg／L，筛选高产突变菌株。再进行发酵罐上工艺优化，分别进行了单批发酵和分批补料发酵研究。结果 获得的高 产突变株其生产能力比出发菌株提高了1000倍。在96、120、144和168h分别补加总体积3％的葡萄糖，该分批补料发酵工艺适合 格尔德霉素工业化生产。结论 格尔德霉素高产突变株的筛选和发酵工艺的确定为该项目产业化奠定了基础。 关键词：格尔德霉素；抗性筛选；突变菌株；发酵；工艺优化 中图分类号：R978 文献标志码：A Resistancescreeningofgeldanamycinhigh—yieldingmutantstrainand fermentationoptim ization ZhuWan-yi，ChenHua，QiuHai—xiao，LuoHong—yu，ZhengLing—hui，WangLing—ping，TapZheng—liandBaiHua (ZhejiangKeyLaboratoryofAntifungalDrugs，ZhejiangHisunPharmaceuticalCo．Ltd．，Taizhou318000) Abstract Objective Toselectgeldanamycin(GDM)high．yieldingmutantfromanoriginalstrain Streptomycesmelanosporofaciens101，bvthemethodofresistancescreening．Also，thefermentationprocessofGDM wasstudied．M ethods Themutantstrainwasscreenedbymutationwithdiethylsulfateandadditionofmetabolic product(GDM)．TheconcentrationofGDM resistancewasincreasedfrom5to1Og／L．Thenfermentationprocess includingbatchfermentationandfedbatchfermentationwereoptimizedtopromotetheproductionofGDM ．Results A high—yieldingGDM mutantstrainwasobtainedwithproductionOf1000timeshigherthantheoriginalone．The processoffedbatchfermentationwithadditionof3％ glucoseat96．120．144andl68hrespectivelywassuitablefor producingthisproduct．Conclusion Theacquisitionofthehigh—yieldingmutantstrainandtheestablishmentofthe femr entationtechniquelaidafoundationtoachievetheindustrializedproductionOfGDM ． Keywords Geldanamycin；Resistancescreening；Mutantstrain；Femr entation；Processoptimization 恶性肿