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生物分离与纯化技术(生化工艺)第3章 萃取技术
常用超临界流体 超临界CO2萃取剂的特点 CO2无毒,无腐蚀性,不可燃烧,纯度高且价格低。 有优良的传质性能,扩散系数大;粘度低, CO2 具有相对较低的临界压力和临界温度,适于处理热敏性生物制品和天然物产品。 CO2 为非极性分子,但能与形成氢键的极性分子互溶,从而溶解极性较大的溶质 超临界流体萃取的特点 ①同时具有液相萃取和精馏的特点。萃取过程是由两种因素:被分离物质挥发度之间的差异和它们分子间亲和力的大小不同. ②超临界流体萃取的独特的优点是它的萃取能力取决于流体的密度→易于通过调节温度和压力来加以控制。 ③溶剂回收很简便,并能大大节省能源。 ④可不在高温下操作产品中无其他物质残留。 超临界流体萃取的流程 二 氧 化 碳 气 瓶 贮 罐 夹带剂罐 萃 取 釜 解 析 釜 解 析 釜 分 离 柱 箱冷 计量流 泵压高 泵压高 超临界流体萃取的流程 超临界流体萃取过程中,产物回收工艺p49 等温变压 等压变温 恒温恒压 超临界流体萃取的影响因素(见p50) 第四节 反胶团萃取 本章重点 反胶团溶液形成的条件和特性 反胶团萃取蛋白质的基本原理 影响反胶团萃取蛋白质的主要因素 基本概念 反胶团是指当油相中表面活性剂的浓度超过临界胶束浓度后,其分子在非极性溶剂中自发形成的亲水基向内、疏水基向外的具有极性内核(polarcore)的多分子聚集体 何谓反胶团 基本概念 反胶团内可溶解少量水而形成微型水池,蛋白质进入微水池中,可随反胶团转入有机溶剂,但不与有机溶剂直接接触,反胶团萃取就是利用这一特性进行蛋白质分离的方法,反胶团溶液是宏观上透明均一的热力学稳定体系。 反胶团萃取 成本低 选择性高 操作方便 放大容易 萃取剂 (反胶团相 )可循环利用 蛋白质不易变性等优点 反胶团萃取的特点 表面活性剂 反胶团(reversed micelle)是表面活性剂分散于连续 有机相中一种自发形成的纳米尺度的聚集体,所以表面活 性剂是反胶团溶液形成的关键。 表面活性剂是由亲水憎油的极性基团和亲油憎水的非极 性基团两部分组成的两性分子,可分为阴离子表面活性 剂、阳离子表面活性剂和非离子型表面活性剂。 反胶团溶液形成的条件和特性 反胶团溶液形成的条件和特性 阴离子表面活性剂 在反胶束萃取蛋白质的研究中,用得最多的是阴离子表面活性剂AOT(AerosolOT),其化学名为丁二酸-2-乙基己基磺酸钠 该表面活性剂容易获得,其特点是具有双链,极性基团较小、能自发形成反胶团,并且所形成的反胶束较大,半径为170nm,有利于大分子蛋白质进入。 反胶团溶液形成的条件和特性 阳离子表面活性剂 常使用的阳离子表面活性剂名称和结构如下: (1)CTAB(溴化十六烷基三甲胺/十六烷基三甲基胺溴) (2)DDAB(溴化十二烷基二甲铵) 反胶团溶液形成的条件和特性 临界胶团浓度 要形成胶团或反胶团溶液,表面活性剂需达到一定浓度。临界胶束浓度是形成胶团或反胶团的表面活性剂的最低浓度,用CMC表示。 反胶团溶液形成的条件和特性 胶团、反胶团的形成 若将表面活性剂溶于非极性的有机溶剂中,并使其浓度超过临界胶束浓度(CMC),便会在有机溶剂内形成聚集体,这种聚集体称为反胶团。 反胶团萃取蛋白质的基本原理 萃取 蛋白质是在反胶团形成过程中进入反胶团 蛋白质须靠近两相界面 在反胶束萃取体系中,表面活性剂与蛋白质都是带电的分子,因此静电相互作用肯定是萃取过程中的一种推动力。 由于蛋白质所带电荷与溶液pH值有直接关系,所以溶液pH值能决定蛋白质能否进入反胶团。 反胶团萃取蛋白质的基本原理 反萃取 界面上不停地形成反胶团,同时有机相中的反胶团也能撞击重新回到界面,二者处于动态平衡 蛋白质最终也会达到萃取平衡 当蛋白质与界面存在排斥力时,蛋白质的萃取平衡被打破 影响反胶团萃取的主要因素 水相pH值对萃取的影响 影响反胶团萃取的主要因素 离子强度对萃取率的影响 离子强度对萃取率的影响主要从一下几个方面: ①影响蛋白质与表面活性剂极性基团的静电作用; ②影响反胶团的含水率; ③离子进入“微水池”影响其他溶质的进入。 影响反胶团萃取的主要因素 表面活性剂类型及浓度的影响 增大表面活性剂的浓度可增加反胶束的数量,从而增大对蛋白质的溶解能力。但表面活性剂浓度过高时,有可能在溶液中形成比较复杂的聚集体,同时会增加反萃取过程的难度。因此,应选择蛋白质萃取率最大时的表面活性剂浓度为最佳浓度。 反胶团萃取的操作过程 制备反胶团溶液 萃取:蛋白质溶液与反胶团溶液充分接触,使蛋白质进入反胶团 反萃取:萃取完成后,取出有机相,加入适当pH和无机盐浓度的水相,使蛋白质回到水相 * * * * * 第3章 萃取技术 第一节
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