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第38卷 第2期 江汉大学学报(自然科学版)
JournalofJianghanUniversity(NaturalSciences) Vo1．38NO．2
2010年6月 Jun．2OlO
种子蛋白质组分分析的综合I生实验设计
胡志辉
(江汉大学 生命科学学院，湖北 武汉 430056)
摘 要 ：种子蛋 白质研究是植物生理生化 实验 的核心部分之一，在大量研究工作的基础上 ，设计 了一
个涉及种子蛋 白质各组分的提取、含量 的测定和SDS—PAGE电泳分析的综合性实验．避免了以往各个小实
验取样不一致而使实验结果难以进行综合归纳比较分析的问题 ，也减少 了重复制样操作环节 ，缩短 了实
验时间，节约了实验成本．
关键词 ：种子蛋 白质 ；组成分析 ；综合性实验
中图分类号：$330．35；G642．423 文献标志码：A 文章编号：1673—0143(2010)02—0068．04
蛋白质研究是植物生理生化实验的核心部分 100pg／mL的标准蛋 白质溶液．
之一 [1-2] 种子贮藏蛋 白质 比较稳定 ，一旦种子 (2)考马斯亮蓝 G一250溶液 ：称取 100mg考
成熟 ，环境和季节等外界条件对其影响很小 ，甚 马斯亮蓝 G一250，溶于50mL90％乙醇 中，加入
至染色体的加倍也很少改变其 同有 的蛋 白质成 100mL85％ (w，＼，)的磷酸 ，再用蒸馏水定容到
分 ，分析种子蛋白质组成 已广泛应用于植物的分 1L，贮于棕色瓶 中．常温下可保存 1个月．
类 、进化 、遗传和变异等方面 咱j． (3)分离胶缓冲液 ：18．17gTris、0．4gSDS，
为了让生命科学类本科生尽早熟悉光学分析 溶于水．用 1mol／LHC1调pH至8．8，定容至 100mL．
技术 、凝胶层析技术和电泳技术 ，掌握种子蛋 白 (4)浓缩胶缓冲液 ：6．06gTris、0．4gSDS，
质组分的提取、分离和纯化技术 ，在大量研究工 溶于水 ，用 1mol／LHCI调pH至6．8，定容 100mL．
作的基础上 ，设计 了一个涉及种子蛋 白质各组分 (5)Acr／Bis贮备液 ：30gAcr、0．8gBis，溶
的提取 、含量的测定和 SDS．PAGE电泳分析的综 解后定容至 100mL．
合性实验． (6)10％过硫酸铵 ：用时现配．
(7)样品缓冲液 ：Tris0．6g、甘油 5mL、SDS
1实验仪器与试剂
1g，溶于水 ，用 HC1调 pH至8．0，再加溴酚蓝
1．1仪器 0．1g，巯基乙醇2．5mL，定容至 100mL．
①分光光度计 ；②分析天平 ；③离心机 ；④ (8)电极缓冲液 ：Tris3．03g、Gly14．14g、
研钵 ；⑤移液器 ；⑥具塞刻度试管 ；⑦容量瓶 ； SDS1．0g，溶于水 ，用HC1调 pH至 8．3，定容至
⑧烧杯 ；⑨量筒 ；⑩漩 涡混合器 ；⑩微量取样 1000mL．
器 ；⑩垂直板电泳槽及 附件 ；⑥直流稳压稳流电 (9)染色液的配制 ：45％甲醇、0．25％考马斯
泳仪 ；⑩微量进样器 ；⑩低温冰箱 ；⑩水浴锅． 亮蓝 R．25
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