分子部分问答题.doc

RNA对转录的调控： 一些酶的活动能够产生短RNA，它们能够控制与其同源的基因的表达抑制。这种被称为“RNA干涉”的抑制，能够以对mRNA翻译的抑制对mRNA的破坏以及使某些控制mRNA表达的启动子发生转录沉默的形式出现。从发育调节到抵抗某些病毒侵染的保护机制中这些RNA均发挥着作用。 短干涉RNA（siRNA）在以下3各方面抑制了同源基因的表达：引起其mRNA的破坏，抑制了其mRNA的翻译；或者促使了启动子内的染色质的修饰，是的基因沉默。单链RNA的出现激活了RISC复合体。而该复合体被激活后，就被引导至于此siRNA互补的RNA序列。到的后，其或者降解该RNA，或者抑制它的翻译。通常后期处理路线的选择取决于或者说至少部分取决于siRNA和靶mRNA之间的匹配程度：如果它们完全互补，则降解；如果匹配的并不很好，则很大程度上是对翻译的抑制。如果降解发生，RISC中的核酸酶活性在其中起主要作用。 小RNA（microRNA），典型的长度为21或22个核苷酸残基，产生于非蛋白编码基因转录的更大前体（长度大学70-90个核苷酸残基），这些转录本含有形成颈环结构的序列，这些机构是由Dicer加工而成的。通过转录本产生的miRNA导致了与其有 同于新女性的靶mRNA的破坏或转录抑制。 λ噬菌体的溶源途径？溶菌途径？二者之间如何进行遗传调控？ （1）溶源途径：λ噬菌体感染大肠杆菌之后，可将其基因组整合到细菌染色体上，并成为细菌基因组的一部分，随染色体DNA 的复制而复制，这一过程称为溶源途径。 溶菌途径：λ噬菌体DNA进入细胞后，利用寄主的酶和原料进行自身复制并形成噬菌体颗粒，最终使宿主裂解而死亡，这一过程称为裂解循环或溶菌途径。 （2）如果宿主细胞生长在丰富培养基上，λ噬菌体进入裂解循环；对数期以后的细菌和培养在缺乏碳源的培养基中的细菌为寄主时有利于溶源化。噬菌体进入裂解循环还是整合到寄主染色体上形成溶源态，主要取决于CI蛋白和Cro蛋白的合成及其调控作用。cⅠ基因编码阻遏蛋白，它的突变使溶源性不能建立而进入裂解循环。 λ噬菌体侵染细菌后，由于PL/OL和PR/OR上没有阻抑物cI的结合，所以细菌RNA聚合酶自PL和PR处开始转录并形成N蛋白和cro蛋白，转录终止于左右两侧的第一个启动子tL1和tR1；N蛋白发挥抗终止作用，使得转录越过左右两个终止子右向转录出复制基因O、P和调节基因Q、cⅡ；左向转录出cⅢ、int、xis、gam基因；cII对于cI的产生是必需的，cII导致细菌的RNA聚合酶识别PRE启动子而向左转录，从而表达cI；cI蛋白产生之后，CⅠ蛋白结合OL1-OL2和OR1-OR2，阻止了聚合酶接近相应的启动子，从而关闭了PL和PR开始的早期转录作用，阻止N蛋白和cro的表达，CⅠ二聚体结合OR2促进RNA聚合酶结合PRM启动子，因此有激活自身转录的作用产生更多的cI。只要阻抑物cI含量充分，cI基因就能够继续表达，结果就造成OL和OR长期被阻抑，使原噬菌体维持溶源状态。 如果前早期基因表达翻译出的Cro蛋白与OR3结合，就会抑制了RNA聚合酶与PRM的结合。就能够停止从PRM处开始的阻抑物CⅠ合成；所以Cro蛋白的第一个作用就是阻止溶原维持回路的运转。Cro蛋白同时跟OR1或OR2，以及OL1或OL2结合，以下调基因表达。通过停止合成cII和cIII蛋白，导致从PRE停止合成阻抑物cI；此后Cro蛋白与OR2或OR1结合，阻止RNA聚合酶利用PR，并进而停止产生早期功能产物，包括Cro蛋白本身。由于cII蛋白不稳定，PRE的作用也被停止，因此，Cro蛋白的这两种作用完全阻断了阻抑物的合成。由Q蛋白激活晚期基因表达，这样噬菌体进入裂解途径。 作为正调控物的cⅡ和cⅢ基因，其产物对CⅠ蛋白合成系统是必须的，CⅠ蛋白的合成是通过CⅡ蛋白激活和RNA聚合酶结合在PRE上的转录：PRE和PI启动子在没有CⅡ时不能起始转录，CⅡ还可以启动Panti-Q的转录，阻碍Q基因的表达。CⅡ蛋白在体内极端不稳定，容易被降解，CⅢ的作用是保护CⅡ抗拒这种降解。缺少CⅢ时，CⅡ事实上总是没有活性。如果CⅡ有活性，经由PRE的阻遏蛋白的合成是有效的，结果，阻遏蛋白获得占据操纵基因的能力。如果CⅡ没有活性，阻遏蛋白的合成失败并且Cro 与操纵基因结合。因此， CⅡ蛋白在决定溶源与裂解途径之间起关键作用。 色氨酸操纵子 trp操纵子是一个典型的可阻遏操纵元模型(repressible operon)。 调节机制： 色氨酸mRNA的5’端有162个核苷酸的前导序列，当RNA的合成启动后除非缺乏色氨酸，否则大部分mRNA仅合成140个核苷酸即终止。前导序列能编码一小段14肽，在该短肽的第10、11位置上是两个色氨酸密码子；两个密码子之后是一段mRN