微透析法进行鬼臼毒素固体脂质纳米粒凝胶经皮药代动力学的分析研究.pdfVIP

摘要 背景 有显著细胞毒性的天然活性物质。 0．5％PPT酊剂是WHO推荐治疗尖锐湿疣 (condyloma 短，药物浓度很快下降，并且对局部组织具有较强的刺激性，易引起皮肤溃烂等 不良反应，当大面积使用时易产生系统吸收毒性。固体脂质纳米粒(solid lipid 代脂质体的新一代药物载体。SLN制剂具有生理相容性好、可控制药物释放、良 好的靶向性、可避免化学不稳定性药物的降解和减少药物对皮肤的刺激作用等 多项优点。因此，SLN作为药物载体应用于经皮给药系统具有良好的发展前景。 为了增加PP，r在皮肤中的滞留量，增强其对病变组织的靶向作用，延长其对病 变细胞的作用时间，达到提高CA的治疗效果同时又尽可能降低其局部和全身毒 副作用的目的，我们以毒性低、生物相容性好的固体脂质材料一硬脂酸、十八 烷酰胺为药物载体吸附或包裹PPT，以Brij78和大豆卵磷脂为混合表面活性剂， 采用改良的乳化蒸发一低温固化法制备了鬼臼毒素固体脂质纳米粒(PPT—SLN) 混悬液。凝胶具有很多优点，如良好的生物黏附作用；充分的三维空间网络结 构，可均匀分散固体脂质纳米粒混悬液，进一步巩固稳定性；能够起到缓释长 效目的等。所以我们进一步制备了鬼臼毒素一固体脂质纳米粒凝胶。为了证明鬼 中文摘要 臼毒素固体脂质纳米粒凝胶的优越性，我们用传统的鬼臼毒素酊剂进行比较。 皮肤病的治疗要求药物在皮损局部靶组织发挥作用，因此检测皮损内的药物 浓度显得尤为重要。皮损内药物浓度不仅是皮损局部药效作用重要的定量指标， 而且是进行皮肤药代动力学研究的关键参数。长久以来，外用制剂的皮肤内浓 度检测因受到研究方法和分析设备的限制，应用和研究现状显得十分滞后。目 前常用的评价药物透皮吸收的方法还是经典的两室Franz扩散方法，所用材料 为离体动物／人体皮肤或人工膜。虽然Franz扩散池法在前期预测药物生物利用 度或等效性方面不失为一种有效的方法，但是该方法还是有很多不足之处。其 中最关键的是没有考虑到体内的血管系统、代谢酶及离体皮肤水分的丢失等问 题。因此体外透皮研究结果不能准确反映药物在皮肤中的吸收、分布、代谢、 转归等局部药代动力学过程。常用的体内评价药物经皮吸收方法，包括胶带剥 离法、示踪技术、吸疱实验、皮肤活检等，不是特异性不高就是具有创伤性， 未能达到微创、实时、精确定位等要求。 新技术。可以用于在体监测外源性物质或内源性物质在组织细胞外液浓度随时 间动态变化的过程。它以透析原理作为取样的基础，模拟了毛细血管能够容许 细胞内外液物质自由扩散的功能。由于具有活体连续取样、 动态观察、 定量 分析、采样量小、组织损伤轻等特点，最近十几年来微透析技术在评价药物 经皮代谢中受到广泛关注。经皮微透析可以对实验动物或人体皮肤组织进行在 体、连续的药物浓度测定，使得在体研究外用制剂的经皮吸收动力学和生物等 效性成为可能。皮肤药物代谢动力学的深入研究会有助于改善药物治疗方案， 开发药物新剂型。另外，经皮给药后，药物可经皮吸收入血，利用血液微透析 技术可以进一步评价外用药物系统吸收毒性。微透析取样的样品浓度低、样品 体积小，因此微透析采样技术的可行性实质上依赖于检测仪器的选择，只要检 测手段的灵敏度足够高，采用微透析技术是完全可行的。液相色谱串联质谱 tandemmass (1iquidchromatography H 硕士学位论文 灵敏度高、特异性强、样品量需求少、分析速度快的特点，其与微透析联用对 生物活体的在线研究有不可替代的作用。因此，LC—MS／MS与微透析系统联用已 经成为生物化学和药代动力学研究的重要方法之一。本研究以灵敏度高、特异 性强的Lc—MS／MS检测微透析样品中鬼臼毒素浓度，并对微透析取样过程中各种 影响因素进行了考察和优化。在此基础上利用皮肤、血液同步微透析技术原位、 在体、实时检测了鬼臼毒素一固体脂质纳米粒凝胶及鬼臼毒素酊剂在大鼠腹部经 皮给药后，在大鼠皮肤、血液中鬼臼毒素浓度随时问变化规律，并进行生物等效 性评价。 目的 1、建立测定大鼠皮肤及血液微透析样品中鬼臼毒素浓度LC-MS／MS法并进