p53对PA28γ基因转录调控的影响Effect of p53 on the regulation of PA28 gamma gene transcription.pdfVIP

分类号 密级 学校代码 10542 学号2Q!!Q星!垒!曼Q垒 p53对PA2@基因转录调控的影响 Theinfluenceof53onthe p of regulationPA287gene 指导教师姓名、职称 周建挞塾拯 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一四年五月 摘 要 肿瘤抑制因子p53主要作为转录因子发挥作用。野生型p53在正常 细胞中表达低。当细胞遭受DNA损伤、缺氧等胁迫时，细胞中的p53蛋 白将会积累并被激活，调控其靶基因的转录，促使细胞周期停滞、凋亡 或衰老。 PA28 y(又叫REGY，11SY，PSME3)是20S蛋白酶体的激活因子之 一，可以和20S蛋白酶体结合，激活其不依赖ATP和泛素的蛋白质降解 途径。另外，PA28Y可以促进MDM2介导的P53的单泛素化和／或多泛素 化，从而导致p53的核输出和／或降解。翩劣r在DNA损伤修复、细胞 增殖、癌变、神经退行性疾病等多种生理、病理过程中发挥重要作用。 但是，该基因的表达调控机制尚不清楚。为了阐明该基因的转录调控机 制，本文对PA28y基因的转录起始位点、启动子及其转录调控了进行 研究。 确定了翩劣y基因的转录起始位点。用荧光素酶实验分析显示PA28r基 因的基本启动子在-193至U+16区域。通过生物信息学分析，发现在PA23 y基因的启动子上有三个p53应答元件(即，p53蛋白结合位点)。染色 质免疫共沉淀和生物素亲和沉淀分析实验都证实p53蛋白可以结合到这 Y基因的表达，而 达p53可以增强剧劣r基因的启动子活性并上调PA28 干扰p53基因则抑制剧纺y基因的启动子活性和表达。而且，P53束lJ激的 PA28 Y转录能够被PA28Y自身所抑制。这些结果说明P53弄IJPA28Y能形 成一个负反馈调节环，维持P53和PA28Y在细胞内的平衡。 本文的研究结果不仅初步阐明了PA28y基因转录调控机制，而且 有助于增进人们对p53功能的认识。 关键词：PA28Y；P53；启动子；转录调节；负反馈调节 ABSTRACT Tumor exertsitsroleasa factor．Innormal suppressorp53 transcription is atlowabundance．Underconditionsofcellularstress cells，p53present suchasDNA or accumulatesinthe damage，hypoxiaoncogenic stimuli，p53 cellandbecomesactivated．Itthen the ofvarious regulatestranscription cell orsenescence． targetgenes，leadingcyclearrest，apoptosis knownas 1 oneoftheactivatorsof PA28y(alsoI通G_，1S丫，PSME3)is 20S combinewith20S