LHRHA对尼罗罗非鱼生长及生长轴相关基因表达的影响.docxVIP

水 生 生 物 学 报ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA第 37 卷 第 1 期201 3 年 1 月Vo l . 37, No.1 Jan. ,2 0 1 3doi: 10.7541/2013.42LHRH-A 对尼罗罗非鱼生长及生长轴相关基因表达的影响马细兰 1, 2, 3勇 1周立斌 3刘晓春 1林浩然 1张(1. 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室, 生命科学学院, 水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室, 广州 510275; 2. 华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;3. 惠州学院生命科学系, 生物技术研究所, 惠州 516007)摘要: 促性腺激素释放激素(GnRH)的主要作用是刺激脑垂体促性激素(GtH)的释放, 亦可促进鱼类生长激素(GH)的释放。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)是哺乳类 GnRH 的类似物, 为了分析 LHRH-A 对尼罗罗非 鱼生长调节的作用, 设计了长期和短期 2 个实验, 采用腹腔注射(剂量 0.1 μg/g 体重)方法, 分析 LHRH-A 对尼罗罗非鱼绝对生长率、特定生长率、肝体系数和肥满度的影响, 并应用荧光实时定量 PCR 方法检测在注 射 LHRH-A 后不同时段(6h、12h、24h、2 周)尼罗罗非鱼垂体 GH、肝脏 GHR 和肝脏 IGF-I 基因的表达变化。 结果表明, LHRH-A 组尼罗罗非鱼的绝对生长率、特定生长率、肝体系数、肥满度均显著高于对照组(P0.05); 注射 LHRH-A 后 12h、24h 垂体 GH mRNA 表达水平均显著升高(P0.05), 2 周后恢复到对照组水平; 注射LHRH-A 后 24h 和 2 周肝脏 GHR mRNA 表达水平显著上升(P0.05); 注射 LHRH-A 后 6h 肝脏 IGF-I mRNA 表达水平显著升高(P0.05), 12h、24h 和 2 周恢复到对照组水平。以上结果提示, LHRH-A 可显著上调尼罗罗 非鱼生长轴相关基因的表达, 从而促进鱼类的生长。关键词: 尼罗罗非鱼; 促黄体素释放激素类似物; 生长; 基因表达中图分类号: Q344文献标识码: A文章编号: 1000-3207(2013)01-0042-06促 性腺激 素释 放激素 (GnRH) 的主 要作 用是 刺激脑垂体 促 性激素 (GtH) 的释放 , 已 有研究表 明GnRH 亦可促进鲤科鱼类生长激素(Growth hormone, GH)的释放[1]。促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)是哺乳类 GnRH 的类似物 , 它既可 刺激鲤科鱼 类 GH 的 释放又能 促进鱼体生 长 [1] 。在鲤 科鱼 类 LHRH-A 以 剂 量依赖方式 刺激鲤鱼 (Cyprinus car-pio)、鲫鱼 (Carassius auratus)和草鱼 (Ctenopharyn- godon idellus)垂体碎片基础的 GtH 和 GH 释放, 并使血清 GH 水平显著提高[2—5]; 在鲷科鱼类, LHRH-A可 促 进黑鲷 (Acanthopagrus schlegeli) 和黄 鳍鲷 (Sparu latus)的 GH 释放, 刺激黄鳍鲷肝脏 IGF-I 基 因的表 达 , 但对黑 鲷肝 脏生长 激素 受体 (Growthhormone receptor, GHR)的基因表达无影响[6, 7]; 而 在鲇科鱼 类 , LHRH-A 不 能促进非 洲 鲇 鱼 (Clariasgariepinus) 和野生鲇(Silurus asotus)GH 的分泌和释放[8, 9], 反映出 LHRH-A 对鱼类生长内分泌调控作用 的种族特异性。尼罗罗非鱼为鲈形目丽鱼科(亦称丽鲷科)[10], 迄今未见 LHRH-A 对其生长调控方面的报道。本文以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为研 究对象, 通过腹腔注射方法分析了 LHRH-A 的促生长 作用, 并应用 Real-time PCR 方法检测了 LHRH-A 对尼罗罗非鱼生长轴相关基因(垂体 GH、肝脏 GHR 和 肝脏 IGF-I)表达的影响, 旨在探讨 LHRH-A 对罗非鱼下丘脑-垂体-肝脏生长轴的调控作用, 以阐明 LHRH-A的促生长作用机制, 为水产养殖提供理论依据。1材料与方法1.1材料尼罗罗非鱼采自广东省番禺国家级罗非鱼良种收稿日期: 2011-10-20; 修订日期: 2012-09-17基金项目: 国家重点基础研究发展计划(973 计划)项目(2010CB126302);