杀虫剂与斑马鱼GABAA及果蝇RDL受体作用的差异Differences in the effects of insecticides on the RDL receptor of zebrafish GABAA and Drosophila melanogaster.pdfVIP

论文题目：杀虫剂与斑马鱼GABAA及果蝇RDL受体作用的差异 学科专业：高分子化学与物理 学位申请人：汪小芬 指导教师： 任天瑞教授 姚建华研究员 摘要 Y．氨基丁酸受体(GABAR)是脊椎动物中枢神经系统和昆虫周缘神经系统中 的抑制性受体，受内源性配体Y．氨基丁酸以及药理学和临床上一些重要药物的 调节，且与人类的许多神经性疾病相关。GABAA受体是GABAR中最重要的之 一，是植物性毒素木防己苦毒宁和一些当前使用的杀虫剂(如林丹、硫丹、氟虫 腈类和阿维菌素)的主要作用靶标，这些化合物作为非竞争性拮抗剂与GABAA 受体结合，能够改变受体的构象，阻断受体通道。昆虫GABA受体分布在昆虫 中枢系统和肌肉连接处，是一些杀虫剂的重要靶标。放射性配体结合实验和电 生理学技术研究表明，昆虫RDL同源五聚体受体能够形成功能性的GABA配 体门控离子通道，但在药理学方面与脊椎动物的GABAA受体存在差异。 鉴于脊椎动物斑马鱼和昆虫GABA受体的晶体结构尚未见报道，本论文采 用计算机模拟的方法，对斑马鱼GABAA受体和果蝇RDL受体的结构及其与小 分子配体的相互作用模式和稳定性方面进行了研究和比较。主要工作内容如下： 1．采用同源建模的方法，以烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinicacetylcholine 跨膜区的三维结构模型，并利用分子动力学和拉氏图(ramachandranplot)对受体 模型进行了优化与合理性评估。斑马鱼GABAA受体与果蝇RDL受体第二跨膜 7、67和97位的氨基酸序列一致性很高，但在结构存在一定的差异， (M2)区中2 的Ser306，两受体在该位置的氨基酸不同，构象的差异很大。 2．采用分子对接和分子动力学方法研究了氟虫腈与斑马鱼GABAA受体和 果蝇RDL受体的结合模式，并比较了氟虫腈与两受体的作用模式和稳定性的差 异。研究结果表明，在斑马鱼GABAA受体中，氟虫腈的结合位点靠近胞内区 一端；在果蝇RDL受体中，氟虫腈的结合位点位于受体第二跨膜区 Ala301～Leu308的区域内。受体．氟虫腈复合物分子动力学模拟的结果表明，两 受体与氟虫腈复合物体系的势能，在模拟过程中很快达到平衡状态，斑马鱼 GABAA受体与氟虫腈之间形成了4个氢键，有2个氢键的概率大于60％；而果 蝇RDL受体与氟虫腈形成了6个氢键，但只有1个氢键的概率大于50％，其复 合物结合的稳定性比斑马鱼GABAA受体一氟虫腈体系低。 3．利用分子对接的方法，研究了部分氟虫腈代谢产物分别与斑马鱼GABAA 受体和果蝇RDL受体的作用方式，并分析了氟虫腈及其代谢产物的对接相互作 用能与生物活性数据之间的关系。结果发现，氟虫腈的代谢产物与斑马鱼 GABAA受体的对接相互作用能比氟虫腈本身要高。基于这个结果，我们推测氟 虫腈的代谢产物可能对斑马鱼的毒性比氟虫腈大。而对果蝇RDL受体而言，氟 虫腈的代谢产物与RDL受体的对接相互作用能与氟虫腈的类似，为此，我们推 测氟虫腈的代谢产物也有一定的杀虫活性。 同源建模分子动力学模拟 关键词：斑马鱼GABAA受体果蝇RDL受体 分子对接氟虫腈代谢产物 II Abstraet acid the 7-aminobutyricreceptor(GABAreceptor)is inhibitory major neurotransmitterinthecentralnervous vertebrateand receptor system(CNS)of nervous ofinsects．Itismodulated pertpheral system byendogenousligand acidandsome andclinical it ^r-aminobutyric importantpharmacolog