OPG对破骨细胞分化过程中细胞骨架的影响及其分子机理The effect of OPG on the cytoskeleton during the differentiation of osteoclast and its molecular mechanism.pdf

OPG对破骨细胞分化过程中细胞骨架的影 响及其分子机理 Influencesof onthe osteoprotegerin ofosteoclastandtheinvolve cytoskeleton inme 0t S19na儿1ng1)a，tnWaVS Drocess ’-，’．，l r I 1 1●，、，、 ● ● nstenClaStdltterentlatlnn 研究生：宋瑞龙 导 师：刘宗平教授 专 业：临床兽医学 资助项目：国家自然科学基金31372495) 江苏省普通高校研究生科研创新计划资助项目(2012) 扬州大学 2014年6月 万方数据 宋瑞龙：OPG对破骨细胞分化过程中细胞骨架的影响及其分子机理 中文摘要 ‘ i 的动态平衡在机体骨重建过程中扮演着重要的角色。破骨细胞数量或功能活性的过度增加 会造成多种骨类疾病，如骨质疏松、风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、牙周炎等。因此，对 破骨细胞分化和骨吸收的研究具有重要的临床意义。在机体生理或者病理条件下，成骨细 of 胞或者基质细胞膜上的细胞核因子．KB受体活化因子配体(recetoractivatornuclear factor．KB activatorofnuclear 而抑制破骨细胞的分化、成熟以及骨吸收活性。 细胞骨架是真核细胞胞质中错综复杂的网络结构，在细胞形态和迁移等方面起着至关 重要的作用。细胞骨架参与细胞内物质运输、信息传递、能量转换、细胞分化与分裂等活 动。研究表明，破骨细胞的骨吸收活性与细胞骨架密切相关。目前关于OPG对破骨细胞 化从而影响破骨细胞的骨吸收功能。虽然细胞骨架在破骨细胞分化和骨吸收过程中扮演着 重要的角色，但是在这个过程中，关于细胞骨架的变化和OPG对细胞骨架的影响仍不清 楚。本论文旨在研究破骨细胞分化过程中细胞骨架的变化和RhoGTPases家族的调控作用 以及OPG的作用，为揭示OPG抑制破骨细胞分化的分子机理提供科学依据。 1．破骨细胞的诱导培养与纯化 破骨细胞是终末细胞，不能够分裂增殖，体内含量极少。为了获得大量有活力的破骨 胞的方法。 度分别为4X103、8X103和1．6X104个／mL，同时添加利用60RANKL和50 ng／mL ng／mL M．CSF处理细胞。结果表明，1．6X 分别培养2d、3d和4d后，出现大量的单核细胞凋亡并伴随破骨细胞产生。结果表明4× 103个／mL接种密度下，破骨细胞产生的数量最多。这说明低接种密度和长时间的诱导有利 于破骨细胞的形成。 万方数据 旦 宋瑞龙：0PG对破骨细胞分化过程中细胞骨架的影响及其分子机理 2．破骨细胞分化过程中细胞骨架的变化 等技术分别检测了破骨细胞分化过程中的细胞形态学和骨架结构，以及RhoGTPases家族、 破骨细