中国对虾贮藏保鲜过程中肌肉蛋白质组学研究Study on proteomics of muscle in the storage and preservation of Chinese prawns.pdfVIP

Submittedto Gongshang Dissertation Zhejiang forMaster’S of Engineering University Degree PROTEINOF MUSCLE STUDYONTHE PROTEOMIC CHINESE CHINENSIS) PRESERVATION AND STORAGE DURING 参窝妻 NOV．2012 ofFood College University GongShang Zhejiang Hangzhou，310035，P．R．China 浙江工商大学硕士论文 中国对虾贮藏保鲜过程中肌肉蛋白质组学研究 摘要 中国对虾是我国最主要的对虾品种之一，具有丰富的营养价值、 消费量大，在我国广泛养殖；但目前也面临众多水产品共同面临的问 题——易腐败变质。因此，人们开发出了各种针对水产品品质进行评 价的方法，如感官评价、物理评价、化学评价、微生物评价等，而从 水产品中蛋白质的角度进行相关研究的报道较少。 近几年来，蛋白质组学发展迅速，其中以双向电泳技术(2一DE)、 蛋白质组学技术为蛋白质组学的发展奠定了坚实基础，也为水产品品 质评价及形成机理的研究提供了新的思路。借助差异蛋白质组学寻 找、筛选并鉴定与中国对虾新鲜度品质相关的蛋白，再通过蛋白数据 库及与该蛋白相关的文献报道进行深入分析，探究中国对虾品质变化 的生理生化基础，能够为基于蛋白质的中国对虾品质评价提供相关依 据。 本研究通过对影响中国对虾肌肉蛋白双向电泳的相关技术参数 进行比较和优化，建立了中国对虾肌肉蛋白的双向电泳技术体系；并 以从贮藏过程中中国对虾样品中提取的低盐溶性蛋白和从保鲜过程 中(壳聚糖涂膜保鲜)中国对虾样品中提取的全肌肉蛋白为研究对象， 对中国对虾肌肉蛋白变化进行了差异蛋白质组学研究，主要的研究结 浙江工商大学硕士论文 果如下： l、中国对虾肌肉蛋白双向电泳体系：在第一向(ⅢF)中，裂解 mM 液配方为8M尿素、2M硫脲、4％C乩廿S、65DTT、0．67％ 4-7、长度17 Bio—Lyte，IPG胶条选择pHcm，蛋白上样体积为300止、 上样量120 v*h，主动水化方式上 lag，搭盐桥，等电聚焦时间80000 样；平衡时间13．5 度胶进行电泳；使用硝酸银染色，并适当控制显色时间；最后对胶进 行扫描获取凝胶图谱，并用PDQuest软件进行分析。该体系能有效提 高中国对虾肌肉蛋白质的2-DE图谱分辨率。 2、通过SDS．PAGE技术研究中国对虾不同溶解性肌肉蛋白质的 变化规律，发现中国对虾的低盐溶性蛋白贮藏过程中部分蛋白发生了 较为明显的变化，故应用双向电泳技术对不同贮藏时间的中国对虾低 盐溶性蛋白的2-DE图谱进行比较研究，从中筛选出8个差异较为