中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)主要过敏原的鉴定与分析中国对虾Fenneropenaeus chinensis主要过敏原的鉴定与分析.pdf

浙江工商大学研究生论文 DissertationSubmittedto Zhej iangGongshang for Master’s of UniVersity DegreeEngineering Identificationand of in chinese analysism句oralergens shrimp， chinensis Fenneropenc【e锐s Author：YayunLiang Science and Major：Food Engineering Fu SupeI．、risor：Prof．Linglin 浙鲈z角矢乎 ZHEJlANGGONGSHANGUNlV兰RSlTY Dec．2015 ofFood College Scienceand Biotechnology Engineering，Zhej iangGongshangUniVers时 1OO18，PR．China Hangzhou，3 万方数据 浙江工商大学研究生论文 洲㈣㈣㈣㈣洲 中国对虾(凡抬刀明叩e咒口P珊cJ}l伽阴始)主要过敏原的鉴定与 分析 摘要 本文主要以中国对虾为实验对象，通过ICR小鼠致敏模型获得 小鼠阴性和阳性血清，再利用双向电泳和Westem b1酣ing技术鉴定中 国对虾中的主要过敏原，质谱分析并通过Mascot数据库搜索后得到 该蛋白的具体信息，再对全蛋白中的过敏蛋白分离纯化，得到纯度高 的过敏蛋白，利用P815肥大细胞致敏模型来分析影响原肌球蛋白致 敏性的因素。本文得到以下结果： 1．考虑到应用于双向电泳的裂解液主要成分是尿素等物质，对小 鼠具有一定的危害，而用试剂盒提取的蛋白浸出液有很高的盐浓度， 不适合用来做双向电泳，故采取两种不同提取液对中国对虾全蛋白提 取来进行小鼠实验，通过行为打分和ELISA测定血清中I萨和IgGl 来判断小鼠的致敏效果。发现这两种方法提取的全蛋白种类及含量接 近，对小鼠的致敏性效果也相似，表现在随着饲养的进行，过敏症状 越来越明显，且在激发期第二周致敏效果最好，这表明这两种蛋白都 能使ICR小鼠过敏，ICR小鼠致敏模型建立成功： 2．建立双向电泳分离中国对虾体系，得到较好的分离效果条件： blotting鉴定中国对虾的过敏原，