人畜共患病学论文.docVIP

1 历史　　在猫、狗和猴等多种动物胃内发现存在螺旋样细菌(Gastrospirillum)，被认为是居栖于胃底腺区的正常菌群，无病原学上的意义[4]。但是，自Warren，J.R.等（1983）在活动性溃疡性胃炎病人胃粘膜上发现弯曲样杆菌来，并证实系胃炎、胃溃疡、胃淋巴组织淋巴瘤等发病原因（Marshall, B.J.等，1984）[5]，进而引起在人类胃病发生原因和防治等重大变革。Mendes,E.N.等[4]（1990）应用透射电镜技术首次发现猪胃窦凹陷部位存在螺旋样菌，并命名为猪胃螺旋菌（Gastrospirillum suis，G. suis），它不同于人幽门弯曲杆菌（Campylobacter，pylori）或幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, HP）。Queiroz, D.M.M.等[6]（1990）有类似的发现。由于PCR 技术、基因序列分析和分子生态等技术的应用，将弯曲杆菌属（Genus Campylobacter）修正为新的螺杆菌属（Genus Helicobacter）,同时，将猪胃螺旋菌更名为暂定猪螺杆菌（Candidatus Helicobacter suis，Can.H.suis）[8]。与人胃螺杆菌I 型（H. heilmannii I）类似（Queiroz, D.M.M.等,1990[6]；Cantet, F.等[7]，1999）。基因序列分析与H.heilmannnii I 型同源99.5%(De Groote D.等，1999）[8]。后来，O`Rourke, J.L.等[9]（2004）也证实此菌与H.heilmannnii I 型有较高的同源性，视为同一菌种。但期间，其命名较为混乱，有称非幽门螺杆菌胃螺杆菌（Gastric non-H. pylori helicobacters，GNHPH；Non-helicobacter pylorihelicobacter, NHPH）[3][10]，幽门样螺杆菌（Helicobacter pylori-like bacteria, HPLB）[11],胃螺旋样菌（Gastrospirillum-like organisms, GLOs）[12],螺杆菌样菌（Helicobacter-like organisms,HLOs）等[13]。最新将其命名为猪螺杆菌（Helicobacter suis sp. nov.,）[1]。　　2 病原学　　用病理组织形态学方法对螺杆菌研究报告较多[2][3][5][22][33]。Roosendaal, L.D.等[14]（2000）对122 头屠宰猪中的胃窦部和食管部112 份样本螺杆菌培养，均未成功。因长期体外培养不成功[2][4][8][14]，影响对其形态深入系统的研究。直到2008 年才取得突破[1]。　　2.1 形态特征　　Baele，M.等[1]（2008）首次成功从猪胃炎和胃食道部溃疡部位分离3 菌株（HS1、HS2和HS3）猪螺杆菌（H.suis）。菌体呈多至6 个紧密盘绕螺旋样，长约2.3-6.7μm，宽约0.9-1.2μm，无周质纤毛。老培养物，菌体多呈球状，革兰氏染色阴性，不形成孢子。通过菌体两端的4-10 个有鞘鞭毛丛的作用而显极强的运动性，鞭毛末端饨状，部分呈球节状，大于鞭毛体平均直径2 倍。　　2.2 培养及生化特征　　在添加 20%胎儿牛血清或10%去纤维马血的BHI 琼脂，布氏琼脂和Mueller-Hinton 琼脂生长。在微氧条件生长，在5%CO2 条件下不生长。厌氧条件生长缓慢，37℃生长良好，25℃和42℃不生长。在1.5%NaCL，1%氨基乙酸，1%牛胆汁或5μg ml-1 甲硝达唑培养基中不生长。氧化酶，过氧化氢酶，尿素酶阳性。TTC、脂酶减少。γ-谷氨酰基转移酶，L-精氨酸芳基酰胺酶和碱性磷酸酶活性强。不水解马尿酸盐和吲哚醋酸盐，硝酸盐量不减少。不产生吡咯烷酮芳基酰胺酶，L-天冬氨酸芳基酰胺酶。　　2.3 分子生物学特征　　Baele，M.等[1]（2008）应用16S rRNA 基因测序方法，FISH 和电子显微镜技术证明分离的3 株猪螺杆菌不同于已报告的螺杆菌属的细菌，属于新菌种。按Qiqgen Taq Mastermix试剂盒操作手册，对3 株菌株制备测定DNA 基因序列抽提物。参照De Groote D.等[8]（1999）PCR 扩增Can.H.Suis 的16SrRNA 的433bp 基因片断（Ca.H.suis）。三菌株间，和与Can.H.suis菌株的同源性均大于99%。与此相近的菌株是Can.H.heilmannnii，H.felis，H.bizzozeronii，H.salomonis 和H.cynogastricus