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人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文 [精品论文] 微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后NF-κB及IκBα表达变化的影响 关键词：微囊化 脊髓损伤 坐骨神经组织细胞移植 许旺细胞 核因子-κB IκBα 蛋白表达 摘要：目的：本实验通过观察和分析微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB因子及IκBα表达变化的影响，探讨微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗促进大鼠急性脊髓损伤功能恢复的作用和分子机理，为微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗脊髓损伤提供理论和实验依据。 方法：取Sprague Dawley（SD）大白鼠120只，体重220～250g，雌雄不拘；健康成年家兔10只，体重2000～2500g，雌雄不拘。随机分为4组：A组（微囊化坐骨神经组织细胞移植组，n=36）；B组（组织细胞悬液移植组，n=36）；C组（单纯损伤组，n=36）；D组（假手术组，n=12）。对各组大鼠行右后肢运动功能BBB评分。无菌条件下取成年家兔预变性处理的双侧坐骨神经干制成组织细胞悬液，低速离心后与1.5％海藻酸钠溶液混合并喷入20mmol/L的氯化钡溶液中制成微囊化坐骨神经组织细胞悬液。A、B、C组建立大鼠T10脊髓右半横断损伤模型，并分别在损伤处移入吸附10μl的微囊化组织细胞悬液的明胶海绵、组织细胞悬液的明胶海绵及明胶海绵，D组只去除椎骨，不损伤脊髓也不移植。术后6h、12h、24h、3d、7d、14d，每个时相点取6只SD大鼠行右后肢运动功能BBB评分后麻醉用4％多聚甲醛经左心灌注，截取移植部位或损伤节段约1cm长脊髓组织。石蜡切片后行尼氏体染色（Niss1染色）、NF-κB和IκBα的过氧化物酶标记的链霉卵白素（Streptavidin/Peroxidase，SP）染色。 结果：术后随时间延长各组动物后肢运动功能均有不同程度的恢复，但都未达到正常水平：3天内各组间BBB评分无显著性差异；而7天后A组和B组大鼠运动功能恢复较好，BBB评分较高，与其它组比较均有显著性差异（Pamp;lt;0.05），且A组比B组恢复更好（Pamp;lt;0.05）。SCI后神经元数量减少，尼氏体脱失、溶解：术后第7天及第14天微囊组Niss1染色神经元数量显著增多（Pamp;lt;0.05）。NF-κB阳性细胞主要见于神经元细胞浆及细胞核内等。大鼠脊髓损伤后上述细胞NF-κB表达增加，24h达高峰水平，3d后开始逐渐降低，7d基本降至正常。微囊组与单损组、细胞组比较差异显著（Pamp;lt;0.05）。而IκBα阳性细胞主要见于神经元细胞及胶质细胞的胞浆内。大鼠脊髓损伤后上述细胞IκBα表达降低，24h降到最低点，3d后表达开始回升，7d逐步恢夏正常水平。微囊组与单损组、细胞组比较差异显著（Pamp;lt;0.05）。 结论：微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对脊髓损伤后NF-κB的活性表达起抑制作用还可以抑制IκBα磷酸化降解环节，对于减轻NF-κB介导的急性炎性反应起到有益作用。而核因子-κB（NF-κB）是最新发现的可能参与急性脊髓损伤的继发性损伤的调控主要因子。所以微囊化兔坐骨神经组织细胞移植可以减轻脊髓原发性损伤之后引起的脊髓再损伤，从而促进损伤脊髓功能的恢复。  正文内容 目的：本实验通过观察和分析微囊化兔坐骨神经组织细胞移植对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB因子及IκBα表达变化的影响，探讨微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗促进大鼠急性脊髓损伤功能恢复的作用和分子机理，为微囊化兔坐骨神经组织细胞移植治疗脊髓损伤提供理论和实验依据。 方法：取Sprague Dawley（SD）大白鼠120只，体重220～250g，雌雄不拘；健康成年家兔10只，体重2000～2500g，雌雄不拘。随机分为4组：A组（微囊化坐骨神经组织细胞移植组，n=36）；B组（组织细胞悬液移植组，n=36）；C组（单纯损伤组，n=36）；D组（假手术组，n=12）。对各组大鼠行右后肢运动功能BBB评分。无菌条件下取成年家兔预变性处理的双侧坐骨神经干制成组织细胞悬液，低速离心后与1.5％海藻酸钠溶液混合并喷入20mmol/L的氯化钡溶液中制成微囊化坐骨神经组织细胞悬液。A、B、C组建立大鼠T10脊髓右半横断损伤模型，并分别在损伤处移入吸附10μl的微囊化组织细胞悬液的明胶海绵、组织细胞悬液的明胶海绵及明胶海绵，D组只去除椎骨，不损伤脊髓也不移植。术后6h、12h、24h、3d、7d、14d，每个时相点取6只SD大鼠行右后肢运动功能BBB评分后麻醉用4％多聚甲醛经左心灌注，截取移植部位或损伤节段约1cm长脊髓组织。石蜡切片后行尼氏体染色（Niss1染色）、NF-κB和IκBα的过氧化物酶标记的链霉卵白素（Streptavidin/Peroxidas