仪器分析第五章 紫外-可见吸收光谱 第四节 第五节 第六节..Convertor.docVIP

第五章 第四节 紫外-可见分光光度计 一、仪器的基本构造 紫外可见分光光度计，其波长范围200～1000nm ，构造原理与可见光分光光度计（如721型分光光度计）相似，都是由光源、单色器、吸收池、检测器和显示器五大部件构成。 1、光源 光源是提供入射光的装置。要求在所需的光谱区域内，发射连续的具有足够强度和稳定的紫外及可见光，并且辐射强度随波长的变化尽可能小，使用寿命长。 在可见区常用的光源为钨灯，可用的波长范围350～1000nm。在紫外区常用的光源为氢灯或氘灯，它们发射的连续光波长范围为180～360nm。其中氘灯的辐射强度大，稳定性好，寿命也长。 2. 单色器 将复合光分成单色光的光学装置。最常用的色散元件是棱镜和光栅。 棱镜通常用玻璃、石英等制成。玻璃适用于可见光区，石英材料适用于紫外光区。光栅也是由玻璃或石英制造。 3. 吸收池 用于盛装试液的装置。吸收池材料必须能够透过所测光谱范围的光，一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英吸收池。 4. 检测器 是将光信号转变成电信号的装置。要求灵敏度高，响应时间短，噪声水平低且有良好的稳定性。常用的检测器有硒光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列检测器。 二、仪器的类型 1. 单光束分光光度计 单光束分光光度计光路示意图如前图所示，一束经过单色器的光，轮流通过参比溶液和样品溶液来进行测定。 这种分光光度计结构简单，价格便宜，主要用于定量分析。但这种仪器操作麻烦，如在不同的波长范围内使用不同的光源、不同的吸收池，且每换一次波长，都要用参比溶液校正等等，也不适于作定性分析 2. 双光束分光光度计检测器 3、双波长分光光度计 第五章 第五节 紫外-可见吸收光谱法的误差和测量条件的选择 一、紫外-可见吸收光谱法的误差 1、溶液偏离朗伯-比尔定律所造成的误差 措施：使用标准曲线直线段测定溶液； 减少试剂空白；确定适宜的浓度范围。 2、仪器误差 措施：确定适宜的吸收池；稳定光源；对仪器经常检查以确定仪器状况等。 3、操作误差 措施：严格控制试验条件。 二、紫外可见吸收光谱法测量条件的选择 1、入射光波长的选择 通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长作为测量波长，称为最大吸收原则，以获得最高的分析灵敏度。而且在附近，吸光度随波长的变化一般较小，波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小，可得到较好的测定精密度。 但在测量高浓度组分时，可选用灵敏度低一些的吸收峰波长(ε较小)作为测量波长，以保证校正曲线有足够的线性范围。如果所处吸收峰太尖锐,则在满足分析灵敏度前提下，可选用灵敏度低一些的波长进行测量，以减少朗伯-比耳定律的偏差。 如果待测物质存在干扰物质，而且在最大吸收波长有吸收，则根据“吸收大，干扰小”的原则选择入射光波长。 2、吸光度读数范围的选择 如果△T=0.5%，T=20-65%（A在0.2-0.7之间）时， △C/C2%，T=36.8%时， △C/C=1.32，误差最小。 3、参比溶液的选择 （1）纯溶剂空白 试液、试剂、显色剂均无色时，直接用纯溶剂或蒸馏水为空白。 （2）试剂空白 试液无色，而试剂或显色剂有颜色时，可在相同条件下，加入相同量的显色剂和试剂（不加试液），稀释至同一体积为参比溶液，可消除试剂中的组分的影响。 （3）试液空白 试剂和显色剂均无色，试液中其他离子有颜色时，可采取不加显色剂的试液为参比溶液，适用于试样中较多的共存组分 4、显色反应条件的选择 （1）显色剂的选择 a 显色反应要灵敏 b 显色反应生成物组成恒定，稳定性好c 对照性要好。 （2）显色剂用量的选择 恒定吸光度值。 （3）pH值的影响 多数显色剂都是有机酸或有机碱，介质的酸碱性直接影响显色剂的离解程度。如铁可与水杨酸在不同酸性条件下生成不同组成的产物。 （4）测量时间及温度 第五章 第六节 紫外-可见吸收光谱法的应用 一、定性分析 依据：吸收光谱的形状、吸收峰的数目、最大吸收波长的位置和相应的摩尔吸收系数。 方法：被测试样与标准样品在相同条件下吸收光谱的比较，或者被测试样的谱图与标准谱图的比较。 二、结构分析 1、根据化合物的UV-VIS推测化合物所含的官能团 （1）200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2）260-350 nm有弱吸收峰（ε=10-100）并且无其它强吸收峰，n→π* 跃迁产生的R 带，存在含有n电子的基团。 （3）250-300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200-2000），芳环的特征吸收（具有精细解构的B带）。 （4） 200-250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有一个