氮源与维生素对鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)高效生产L-乳酸影响的研究 Effects of Nitrogen Sources and Vitamins on Production of L-lactic Acid with High Efficiency Using Lactobacillus rhamnosus.pdfVIP

■圈譬圈图冒■!竺业型望!些竺型坠型型业型些斗 r庇nm聆Ds比s) 氮源与维生素对鼠李糖乳杆菌(L口cfD易ncⅢ比s 高效生产工厂乳酸影响的研究 李海军，林建群，林建强，曲音波 (山东大学生命科学学院，微生物技术国家重点实验室，山东济南，250100) 摘 要 在L一乳酸发酵生产中，用廉价的黄豆粉补充微量维生素液，替代培养基中昂贵的酵母粉，L一乳酸的产 物浓度和得率与使用酵母粉相比相差不大。氮源经优化后，使用3．5％～4．5％的黄豆粉并添加最优剂量的8 L发酵罐实验，3．5 种维生素混合液，摇瓶实验，120g／L葡萄糖转化得到104g／L的L一乳酸，得率为86．7％；5 ％的黄豆粉补充维生素混合液，初始葡萄糖浓度150g／L，L一乳酸浓度为128g／L，得率达到85．3％，基本达到了 以酵母粉做氮源和生长因子的发酵指标。 关键词L一乳酸，鼠李糖乳杆菌，维生素，发酵 乳酸广泛存在于人体、动物、植物和微生物中，乳 究了氮源与维生素对鼠李糖乳杆菌(L口c￡o沈c洌“3 酸及其盐类、酯类在食品、医药及化学工业等领域具 有广泛的用途[1卅]，需求量也在逐年增加。目前，全 酵培养基中酵母粉的经济的替代物，以降低L-乳酸 生产的原料成本。 世界的乳酸产量已超过10万t，预期到2010年，产量 可突破100万t，将可由精细化学品一跃而成为大宗 1 材料与方法 日用化学品。 乳酸分子中具有不对称C原子，因此有L_、D乳1．1菌种、培养基及培养方法 酸2种旋光异构体及DL_乳酸外消旋体。由于人体 菌种：鼠李糖乳杆菌，经过高葡萄糖、高乳酸液体 只具有分解L-乳酸的酶，故人体只能代谢L_乳酸。培养基传代培养与平板分离的初步菌种选育。 因此在用于食品及医药工业时，以L_乳酸代替D或 DL一乳酸是发展趋势[4]。而最具应用潜力的是用L_ 乳酸为原料生产聚乳酸(PLA)，制造生物可降解性塑7H200．1，KH2P042，MnS04·H20O．05，吐温 min。 料口]。有统计资料表明，日本现在每年需要生物可降 80，1mL，pH6．5，115℃灭菌20 解塑料o．3万t；2010年10万t；到2020年需要 o．2， 1 0．03， 500万t；全世界10000万t，每年以14％的增长率KHzP040．3，K2HP04O．3，MnS04·H20 增长[6]。可见，L一乳酸的市场潜力巨大，发展前景十 FeSO。·7H。Oo．03，另外加一定量的葡萄糖作为碳 分诱人。 源，以及酵母粉或其他含氮物质作为氮源(详细说明 5．5～6．o；115℃灭菌20min。 乳酸杆菌是优良的生产L一乳酸的细菌，但它在 见下文)；pH 高糖浓度下会受到抑制并且它对营养要求苛刻，需要 复合维生素液：叶酸2弘g／mL，烟酸5mg／mL， 添加多种氨基酸和生长因子[7’8]，在所有研究的复合 泛酸钙3mg／mL，烟酸吡哆醇0．5mg／mL，生物素 20 mg／mL，盐酸硫胺素5 氮源当中，酵母粉对于乳酸菌的生长和L一乳酸发酵 pg／mL，对氨基苯甲酸2 是最理