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2017年高考生物一轮总复习 专题3-6 植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课件(选修1)
(4)两次加蒸馏水的目的: ①第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂(注:植物 细胞是用洗涤剂溶解细胞膜)。 ②第二次加蒸馏水是为了稀释 NaCl 溶液,析出 DNA。 (5)用纱布过滤 3 次的目的: ①过滤血细胞破裂液,提取细胞核物质(滤液)。 ②滤取0.14 mol·L-1NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)。 ③过滤溶有DNA的2 mol·L-1NaCl溶液(滤液)。 (6)用NaCl溶液4次的目的: ①加2 mol·L-1NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质。 ②(加蒸馏水)0.14 mol·L-1NaCl溶液使DNA析出。 ③加2 mol·L-1NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物。 ④用2 mol·L-1NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA。 (7)DNA易吸附在玻璃容器上,所以实验中最好使用塑料烧杯、试管、容器,以减少DNA的损失。 3.去除滤液中的杂质的其他方案: (1)方案一:用嫩肉粉(蛋白酶),它能水解蛋白质,但对DNA 没有影响。 (2)方案二:加热至 60 ℃~75 ℃,大多数蛋白质不能忍受 60 ℃~75 ℃的高温而变性,但 DNA 不变性。 ◎ 高考探究 ◎ 考向 DNA 的粗提取与鉴定 [典例](2014 年湖北模拟节选)请回答下列有关细胞和分子 生物学技术的问题: (1)DNA 粗提取的实验原理是:DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同,在____________mol/L 的 NaCl 溶液中的 最低;鉴定 DNA 所用的试剂是______________,沸水浴加热 呈__________色;实验中使用酒精的目的是________________; 实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细 胞涨破释放出 DNA,第二次目的是______________________。 (2)PCR 技术的中文全称是______________,在操作过程中 需要添加引物,它的化学本质是__________________。反应过 程中控制不同温度的意义是不同的:90 ℃以上时____________ _______,双链 DNA 解聚为单链;50 ℃左右时______________ _______,引物与两条单链 DNA 结合; 72 ℃左右时延伸,Taq DNA 聚合酶有最大活性,使 DNA 新链沿着______________方 向延伸。 [解析](1)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同, 在 0.14 mol/L 的NaCl 溶液中的最低;DNA 遇二苯胺(沸水浴) 会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂;DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的蛋白质等某些物质则可以溶于 酒精溶液,利用酒精可以除去溶于酒精的蛋白质等物质获取较 纯净的DNA;实验过程中两次用到蒸馏水,第二次加蒸馏水的 目的是稀释NaCl 溶液的浓度,使DNA 析出。(2)PCR 技术的中 文全称是多聚酶链式反应;引物的本质是 DNA 或RNA;反应 过程中控制不同温度的意义是不同的:90 ℃以上时DNA 变性 形成单链,50 ℃左右时,单链DNA 与引物结合,叫复性,72 ℃ 左右时延伸,DNA 聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5′-3′)的方向 合成互补链。 [答案](1)0.14 二苯胺 蓝 除去溶于酒精的蛋白质 稀释 NaCl 溶液 (2)多聚酶链式反应 DNA 或 RNA 变性 复性 5′端 向 3′端 【考点练透】 2.下图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验装置: (1)在图①所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_________ ____________,通过图②所示的步骤取得滤液,再在溶液中加 入 2 mol/L 的 NaCl 溶液的目的是________________________; 图③所示实验步骤中加蒸馏水的目的是__________________。 (2)鉴定 DNA 的方法是,向溶有DNA 丝状物的试管中加入 ___________试剂,混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min, 冷却后可观察到溶液呈____________;也可取少许 DNA 丝状 物置于载玻片上,滴一 _____________溶液,片刻后用水冲洗, 可见丝状物被染成___________________________________。 解析:(1)实验中为了提取出细胞核物质,利用渗透作用原 理,向鸡血细胞液中加入蒸馏水,加上玻璃棒的快速搅拌,使 血细胞吸水胀裂,释放出其中的核物质。DNA 物质在不同浓度 NaCl 溶液中的溶解度不同,在2 mol/L NaCl 溶液中
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