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发酵过程的室研究中试和放大
十一章 发酵过程的实验室研究、中试和放大 本章重点 一、工业发酵过程研究的阶段及各阶段的研究内容 二、实验室研究的目的及主要内容 三、了解最优化实验设计的方法 四、发酵规模缩小与放大的准则及方法 一、工业发酵过程研究的三个规模(阶段) 实验室规模: 进行菌种的筛选和培养基的研究; 中试生产规模: 确定菌种培养的最佳操作条件; 工厂生产规模: 进行大规模生产,取得经济效益 工业发酵过程(微生物培养过程)研究的主要作用 1.将科研所得的新方法应用于工业生产 2.通过试验找到更好的菌种、更佳的培养基和培养条件以及更好的设备去改进生产 二、实验室研究 实验设备 摇瓶实验 实验室研究和统计学方法 实验设备 一般的培养仪器和设备,如培养皿、培养箱等; 摇瓶机或摇床; 发酵罐; 固体培养设备 摇床(摇瓶机) 往复式和旋转式 摇瓶规格:250ml、500ml、1000ml、4L、50ml或者更小的试管 装挡板或支持台倾8-30°可提高通气效果 往复式摇床适用于培养细菌和酵母 旋转式摇床传氧速率较好、功率消耗较小、培养基不会溅到瓶口,较常用 摇床都应放在有加温或冷却设备的控温室里 发酵罐 发酵罐体积选择 1L发酵罐用于制备种子和适应性试验 4-28L发酵罐适用于基础考察试验 30-150L或更大的发酵罐适于中间放大试验 密闭厌氧发酵罐 用于厌氧发酵: 酒精、啤酒、丙酮丁醇等 通气搅拌发酵罐 机械搅拌通风发酵罐 通风搅拌发酵罐 固体培养设备 浅盘、转桶 固态发酵可分为浅盘法、转桶法和厚层通气法 摇瓶实验 摇瓶实验:就是在一定大小体积的锥形瓶中装入一定量的培养基(一般为瓶体积的10%-20%),配上瓶塞,经灭菌后,接入菌种,在摇床上进行恒温振荡培养。 培养一段时间后,分析测定溶液中的有关参数和产物得率。 摇瓶培养影响微生物生长的物理因素 1.溶解氧 摇瓶培养所需的氧气是由表面通气供给的。 氧传递速率大小由三方面的因素决定:摇床振荡的频率和振幅的大小;培养基体积与摇瓶总体积的比率;摇瓶的形式。 2.瓶塞对氧传递的阻力 在保证除去杂菌的前提下,尽量选用传质阻力小的瓶塞材质和厚度。 摇瓶培养影响微生物生长的物理因素 3.水蒸发的影响 DO/菌浓/产物浓度 4.比表面积的影响 装液量改变,引起比表面积改变。装液量减少,瓶中的比表面积增加,氧传递速率增加。通过实验求得培养基的最适装入量。 摇瓶实验中,摇床的回转速度和偏心距不要发生变化 停机对发酵结果也会产生影响 实验室研究的目的 1.研究菌种的保藏 2.研究菌株在固体培养基上培养和繁殖条件 3.考察培养基最适组成 4.实验室规模的培养技术 摇瓶研究的主要内容 1.确定培养基的组成 2.考察通气强度、种子类型、种子菌龄、接种量、发酵周期对研究结果的影响 三、最优化实验的设计 常采用统计设计学的方法来进行最优化条件的考察实验 作少量次数的实验,就可求得各个参数之间的数量关系 正交设计法:均匀分散、整齐可比 用正交表来安排少量的实验,从多个因素中分析出哪些是主要的,哪些是次要的,以及它们对实验的影响规律,从而找出较优的工艺条件。 正交表是正交试验设计中安排实验和分析实验的工具,用正交表安排的实验方案有代表性,能够比较全面地反映各水平对指标影响的大致情况 正交实验设计步骤: 1 )明确实验目的,确定考核指标。 2 )挑因素,选位级,确定因素位级表。 3 )选择适宜的正交表。 4 )因素位级上正交表,确定试验方案,并 按实验方案进行试验。 5 )试验结果分析。 均匀设计法:是我国数学家创造的更为有效的统计学方法 特点:均匀分分散、整齐可比 均匀设计按均匀设计表来安排实验 均匀设计表在使用时注意:均匀设计表中各列的因素水平不能像正交表那样任意改变次序 均匀设计可使每个实验点具有更好的代表性,实验次数也大大减少。 可作为发酵条件和培养基配方等方面优化实验中的设计方法 均匀设计法与正交设计法的比较 均匀设计中实验次数少,每个因素每个水平只做一次实验 均匀设计中适当调整水平顺序,就可避免高(或低)档次水平相遇 均匀设计用电子计算机处理实验数据,可得到定量的回归方程式,便于分析各因素对实验的影响,定量的预测优化结果 应用均匀设计
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