[医疗保健]细菌的形态与染色.pptVIP

实 验 细菌的形态与染色 一. 录像：微生物学发展史 二. 实验室规则介绍（生物安全） 三. 细菌形态示教及示教操作 四. 学生操作： 革兰染色法（Gram stain) 五. 作业 实验室规则介绍（生物安全） 牢固树立“有菌观念” 严格执行“无菌操作” 严防“杂菌污染” 实验室规则介绍（生物安全） 一. 安全使用水、电、煤 二. 保持实验室安静有序、爱护实验器材 三. 培养良好习惯，树立自我保护意识 穿实验服 不在实验室内吃东西 不将任何实验材料（如细菌涂片、细菌培养物）携带出实验室 实验室规则介绍（生物安全） 若有传染性材料污染桌面、地面、书、衣物或人体，应立即报告教师，并在教师指导下进行消毒处理 实验用过的物品归还原处，带有传染性的吸管、玻片等，必须放在指定地点 实验结束后，清洗消毒（0.1%新洁尔灭溶液中浸泡）双手后方可离开 四. 做好实验室清洁卫生工作 细菌形态示教及示教操作 细菌的形态结构 细菌的大小及排列 细菌的基本结构 细菌的特殊结构 荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢 3.细菌的染色检查法 细 菌 形 态 示 教—— 荚膜 肺 炎 球 菌 荚 膜 （capsule） 细菌形态示教—— 鞭毛、菌毛 菌毛 pilus 电镜下 变形杆菌周身鞭毛flagellum 光学显微镜下 细 菌 形 态 示 教—— 芽孢 破伤风杆菌芽孢 endospore of C.tetani 光学显微镜下形态 电子显微镜下形态 G+菌 G-菌 等电点 PI 2~3 PI 4~5 ? 带负电荷多 带负电荷少 通透性 低 高 肽聚糖多，脂质少 肽聚糖少，脂质多 ? 酒精不易进入 酒精易进入 Gram stain 原 理 Gram stain 意 义 1.?鉴别细菌：分成G+菌和G－菌 2. 选择药物： G+菌和G－菌对抗菌药物 敏感性不一样 3. 与致病性有关： G+ 菌产生外毒素 G－菌产生内毒素 革兰染色法 Gram stain 学生操作：两人一组 材料：两人一组 菌种： 表皮葡萄球菌及大肠杆菌斜面各一支 玻片每人1张 革兰染色液一套 接种环每人一支 革兰染色法 Gram stain 基本过程： 涂片 干燥 固定 4. 染色 接种棒冷却 事先加好NS 量少 革兰染色法 Gram stain 1. 涂片制备：按下图分别加生理盐水各一滴，再按下图分别加菌研匀 菌 1 菌 1+ 菌 2 菌 2 革兰染色法 Gram stain 制备一张好涂片的基本要素： 1.玻片不含油脂(若有油脂可用卷筒纸蘸95%酒精擦干净)。 2.生理盐水应尽量少加。 3.取菌不宜过多。 2.干燥： 自然干燥或烘干（标本面朝上） 3.固定： 热固定（火焰上来回通过3次固定） 目的： 1. 使细胞质凝固,以固定细胞形态,并使之牢固附着在载玻片上。 2. 杀死细菌，操作更安全 涂片 结晶紫初染1min 碘液媒染1min 95%酒精脱色30s 复红复染30s 水洗，干 革 兰 染 色 全 过 程 示 意 图 （紫 碘 酒 红， 1 1 半半，每次水洗，阳紫阴红。） 水洗，干 烘干,油镜检 水洗，干 水洗，干 水洗，干 实 验 报 告（格 式） 一. 目的 二. 材料与方法 三. 结果（需用彩笔画示意图） 四. 分析与讨论 作为平时成绩记入总成绩 革兰染色影响因素分析 脱色是关键 菌液涂片不能太厚 3. 细菌生长周期的影响 细 菌 形 态 示 教（革兰染色） Streptococcus 链球菌 streptococcus 链球菌 Staphylococcus 葡萄球菌 E.Coli 大肠杆菌 细 菌 形 态 示 教 美 蓝 染 色 奈 瑟 染 色 脑脊液标本涂片中的脑膜炎双球菌 1. 分成10组，每组2~3人，每组成员参与讨论1次，以小组计成绩，占总成绩的10%。 2. 评价指标包括以下5个方面（每个指标2分）： A. 主题明确，讲解思路清晰并能即兴回