NDF、ADF测定.pptVIP

NDF、ADF测定 目 的 传统的粗纤维测定方法存在着重要的缺点，即所测得的结果是包括部分半纤维和纤维素，以及大部分木质素在内的一组复合物，又因为有部分半纤维素和少量纤维素，木质素溶解于酸和碱溶液中，被计算到无氮浸出物中去了。 传统分析法测定的饲料中粗纤维和无氮浸出物的含量均不能反映出饲料本身被家畜利用的真实情况，而范氏洗涤纤维分析法则能弥补这些不足，可以准确地获得植物性饲料中所含的半纤维素、纤维素、木质素以及酸不溶灰分的含量。 原 理 植物性饲料如一般饲料、牧草和粗饲料经中性洗涤剂（3％十二烷基硫酸钠）分解则大部分细胞内容物溶解于洗涤剂中，其中包括脂肪、糖、淀粉和蛋白质，统称之为中性洗涤剂溶解物（NDS），而不溶解的残渣为中性洗涤剂纤维（NDF），这部分主要是细胞壁部分如：半纤维素、纤维素、木质素、硅酸盐和极少量的蛋白质。 原 理 酸性洗涤剂可将中性洗涤纤维（NDF）中各组分进一步分解。 植物性饲料可溶于酸性洗涤剂的部分称为酸性洗涤剂溶解物（ADS），主要有中性洗涤剂溶解物（NDS）和半纤维素，剩余的残渣称为酸性洗涤纤维（ADF），其中含有纤维素、木质素和硅酸盐。 此外，由中性洗涤纤维（NDF）与酸性洗涤纤维（ADF）值之差即可得到饲料中的半纤维素含量。 原 理 酸性洗涤纤维经72％硫酸的消化，则纤维素被溶解，其残渣为木质素和硅酸盐。所以，从酸性洗涤纤维（ADF）值中减去72％硫酸消化后残渣部分则为饲料中纤维素的含量。 将经72％硫酸消化后的残渣灰化，会分则为饲料中硅酸盐的含量，而在灰化中逸出的部分即为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。 仪器与试剂 锥形瓶250ml 定量滤纸 电炉 中性洗涤剂 酸性洗涤剂 烧杯 容量瓶 中性洗涤剂配制 中性洗涤剂（3％十二烷基硫酸钠）准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C16H14N2O8Na22H2O，化学纯，372.24）和6.8g硼酸钠（NaB4O710H2O，化学纯，381.37）一同放入1000ml刻度烧瓶中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaSO4，化学纯，288.38）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，化学纯，90.12）；称取4.56g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，化学纯，141.96）置于另一烧杯中，加少量蒸馏水微微加热溶解后，倾入第一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，此溶液Ph在6.9～7.1左右（ph一般不需要调整）； 酸性洗涤剂配制 酸性洗涤剂（2％十六烷三甲基溴化铵）称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，化学纯，364.47）溶于1000ml，1.00mol／L硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤； 1.00mol／L硫酸 取约27.87ml浓硫酸（H2SO4，化学纯，96％，比重1.84）慢慢加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶中定容，标定； 测定步骤 1. 中性洗涤纤维测定步骤 A 准确称取风干样（通过40目）1.0g，置于高脚烧杯中。 B 加入室温的中性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘（消泡剂）以及0.5g无水亚硫酸钠，不要求十分准确。 C 套上冷凝装置，立即置于电炉上尽快煮沸（5～10min），溶液沸腾后调节电炉使其始终保持在微沸状态1h。 D 煮沸完毕后离火冷却10min，将已知重量的玻璃坩埚安装在抽滤瓶上，将残渣全部移入，抽滤并用2倍于残渣的沸水冲洗抽滤。 E 用20ml丙酮冲洗2次，抽滤。 F 取下玻璃坩埚，在105℃条件下烘干，称重。 测定步骤 2. 酸性洗涤纤维测定步骤 A 同中性洗涤纤维测定步骤A B 加入室温的酸性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘。 C 同中性洗涤纤维测定步骤C D 趁热用已知重量的玻璃坩埚在抽滤装置上过滤（抽滤），将残渣团块用玻棒打碎后，用20ml沸水浸泡15～30s后冲洗过滤，反复三次。 E 用少量丙酮洗涤残渣，反复冲洗滤液至无色为止，抽净全部丙酮。 F 同中性洗涤纤维测定步骤F 结果计算 * 无水亚硫酸钠 丙酮 十氢化萘 *