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第二节
荧光探针技术基本知识介绍
1
什么是荧光?
紫外线 紫外线
荧光素溶液 罗丹明溶液 22
一、荧光探针技术的基本概念
3
hv
4
hv
'
hv
5
(一)荧光 (fluorescence )
Luminescence is the emission of light from any substance
and occurs from electronically excited states. Luminescence is
formally divided into two categories, fluorescence and
phosphorescence , depending on the nature of the excited states.
The electron in the excited orbital is paired ( of opposite spin ) to
second electron in the ground-state orbital. Consequently, return
to the ground state is spin-allowed and occurs rapidly by emission
8 -1
of a photon. The emission rates of fluorescence are typically 10 s ,
so that a typicalfluorescence lifetime is near 10ns(1010-9s).
——Principles of Fluorescence Spectroscopy, Joseph R. Lakowicz
6
(二)基态、激发态、单重态、三重态、激发单重
态、激发三重态
分子都含有不停地运动着的电子。根据量子学理论,运动
着的电子处于一系列不连续的能量状态 (即能级),可以从一
个能级向另一个能级跃迁,并伴随着与能级差相对应的特定能
量的吸收和释放。一般情况下,电子总是处于能量最低的能级
(即基态, ground state )。在一定条件下,电子可以吸收能量
(如光能、电能、热能、化学能、摩擦能等)跃迁到较高能级
(即激发态, excited state ),这个过程称为激发。处于激发态
的电子是不稳定的,它总是要跃迁回基态,并将多余的能量释
放出去。跃迁的方式可能是辐射跃迁,也可能是非辐射跃迁。
以非辐射方式跃迁
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