不同沉淀方法处理胶乳总RNA对基因扩增效率的影响-生物技术通报.PDFVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 11 :124-129 不同沉淀方法处理胶乳总 RNA 对基因扩增效率的影响 1 1 2 1 吴春太  黎瑜  冯伟瑜  曾日中 （1. 中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 海南省热带作物栽培生理学重点实验室， 儋州 571737 ；2. 海南大学农学院，海口 570228） 摘 要 ： 为探明沉淀方法对胶乳总RNA 提取及PCR 扩增效率的影响，并寻求较好的RNA 沉淀方法，针对胶乳中蛋白、多糖、 橡胶粒子含量高的特点，在本实验室改进的SDS 法的基础上，分别用LiCl、NaCl+ 异丙醇、NaCl+NaAc+ 无水乙醇和NaAc+ 无水乙 醇对橡胶树胶乳总RNA 进行沉淀，并对所得RNA 的完整性、纯度、含量和RT-PCR 扩增效率进行比较。结果表明，4 种方法均可 获得完好的RNA，但其纯度、含量和PCR 扩增效率随方法不同而有所差别，其中NaCl+NaAc+ 无水乙醇沉淀的橡胶树胶乳总RNA 纯度、产率和18S、REF 基因扩增效果均较高，故认为用NaCl+NaAc+ 无水乙醇沉淀胶乳总RNA 是一种较为有效的方法。 关键词 ： 橡胶树胶乳 ；总RNA 提取 ；RNA 沉淀 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.11.014 Effects of the Latex Total RNA Precipitated with Different Methods on Amplification Efficiency 1 1 2 1 WU Chun-tai LI Yu FENG Wei-yu ZENG Ri-zhong （1. Rubber Research Institute ，Chinese Academy of Tropical Agriculture Sciences/Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree ，Ministry of Agriculture ，the People ’s Republic of China/Hainan Provincial Key Laboratory of Physiology for Tropical Crops ， Danzhou 571737 ；2. College of Agriculture ，Hainan University ，Haikou 570228 ） Abstract: This work is to find out the effects of different precipitation methods on the latex total RNA and amplification efficiency of PCR as well as to seek the better precipitation method. According to the characteristics that Herva brasiliensis latex was rich i