实时无标记心肌细胞功能分析技术在心肌细胞研究中的应用 Jan2015.pptx

实时无标记心肌细胞功能分析技术在心肌细胞研究中的应用唐炜 ACEA Biosciences 分子机制研究及治疗探索的细胞学基础实时无标记心肌细胞功能分析 （RTCA, Real Time Cellular Ananlysis)心脏再生分子机制研究治疗探索心肌细胞研究心肌生理特性：自律性、兴奋性、传导性、收缩性心肌细胞的兴奋-收缩偶联心肌细胞研究常用实验方法内容方法内容参数膜片钳单细胞电位记录单细胞记录，手工方法电生理信号电位MEA多细胞电位记录多细胞记录，电生理信号电位荧光探针细胞离子浓度标记方法，检测离子浓度变化，与电位变化相关联电位langendroff心脏灌流离体心脏，器官水平，心脏搏动收缩2014 ACEA BIO- Confidential心肌细胞研究常用实验方法内容方法内容参数膜片钳电极记录单细胞记录，手工方法电生理信号电位MEA电极记录多细胞记录，电生理信号电位荧光探针荧光标记标记方法，检测离子浓度变化，与电位变化相关联电位？？多细胞收缩langendroff心脏灌流离体心脏，器官水平，心脏搏动收缩2014 ACEA BIO- Confidential心肌细胞研究常用实验方法内容方法内容参数膜片钳电极记录单细胞记录，手工方法电生理信号电位MEA电极记录多细胞记录，电生理信号电位荧光探针荧光标记标记方法，检测离子浓度变化，与电位变化相关联电位？？多细胞收缩电位langendroff心脏灌流离体心脏，器官水平，心脏搏动收缩2014 ACEA BIO- ConfidentialCardioECR 系统-心肌细胞功能检测的多参数平台同时记录心肌细胞的搏动特性和电位信号；可对心肌细胞进行电刺激，驱动同步化跳动舒张期收缩期CardioECR 系统:基于微电子阻抗技术的细胞检测方法心肌细胞的跳动，收缩直接影响细胞在检测板上的粘附，最终导致阻抗的变化实时无标记细胞分析技术实时监测心肌细胞功能4种不同心肌细胞的搏动特征性曲线Beating PatternSource of CardiomyocytesMorphology of Beating PatternPattern 1: Upward only Primary Neonatal Rat Cardiomyocytes (mixture of different cell types)Cor.At cells (95% purity)(Mouse ES-derived)Pattern 2: Downward onlyHuman ES-derived cardiomyocytes (GE cells) (30-45% purity)Pattern 3: Upward and DownwardiCell cardiomyocytes(95% purity)(Human iPS-derived)CardioECR 系统:基于场电位电极检测的细胞电位记录记录心肌细胞的电位信号；检测Na,K, Ca离子通道活性及功能CardioECR 系统-心肌细胞功能检测的多参数平台CardioECR系统心肌细胞功能性检测流程心肌细胞功能性搏动及电位检测长时程心肌细胞活性检测实时心肌细胞功能检测的主要应用心肌细胞特性及药物心脏毒性机制研究心律失常模型的建立及药物的评估心肌细胞的诱导效率及细胞活性评估药物心脏安全性评估心肌细胞质控CardioECR检测Ca通道抑制剂Nifedipine钙离子阻断剂，降血压及预防心绞痛的药物,能使血管扩张,让更多的血液顺畅地通过血管而达到降血压的目的。CardioECR检测Ca通道抑制剂NifedipineECR信号：缩短FPD增强FRImpedance信号：缩短IMPD增强搏动频率CardioECR检测Na通道抑制剂Flecainide属类抗 心律失常 药，具高效、强效、广谱的特点。抑制心脏的传导系统和心室肌的传导。ECR信号CardioECR检测Na通道抑制剂FlecainideECR信号：降低FP spike延长FPDImpedance信号抑制搏动频率CardioECR检测hERG通道抑制剂E4031引起的心律失常CardioECR检测典型hERG抑制剂引起的心律失常为什么同时检测心肌细胞搏动及细胞电位？Case 1: Blebbistatin, 肌球蛋白抑制剂抑制心肌细胞收缩但不影响动作电位为什么同时检测心肌细胞搏动及场电位？Case 2: Lidocaine（抗心律失常药）主要影响动作电位实时心肌细胞功能检测的主要应用心肌细胞特性及药物心脏毒性机制研究心律失常模型的建立及药物的评估心肌细胞的诱导效率及细胞活性评估药物心脏安全性评估心肌细胞质控基于CardioECR建立心律失常模型及进行药物评估钙离子阻断剂，降血压及预防心绞痛的