λ噬菌体溶源途径和裂解途径的基因调控.doc

λ噬菌体溶源途径和裂解途径的基因调控 摘要 λ噬菌体侵染细胞后，大多数情况下进入裂解循环，λDNA复制，产生较多的噬菌体粒子。而在以对数期以后的细菌和培养在缺乏碳源物质的培养基中的细菌作为寄主时进入溶源化途径，只有与溶源化有关的少数基因如cI才被表达。另外溶源性细菌受到UV照射等因子诱导时，原噬菌体可以脱离细菌染色体而进行自我复制，最终导致细菌裂解，游离出大量噬菌体。噬菌体是进入裂解循环还是整合到寄主染色体上形成溶源态，这主要取决于CI蛋白和Cro蛋白的合成及它们的调控作用。 关键词 λ噬菌体，溶源化，裂解，基因调控，CⅠ蛋白，Cro蛋白 λ噬菌体基因组和调控区 λDNA分子总长度为48.5kb，编码66个基因（如下图所示），可分为三个区域：1.左臂区，自基因A到基因J，包括参与噬菌体头部蛋白质和尾部蛋白质合成所必需的全部基因。2.中间区，介于基因J和基因N之间，这个区又称为非必需区，包含了与重组有关的基因（如基因gam）以及使噬菌体整合到大肠杆菌染色体中去的int基因和把原噬菌体从寄主染色体上切除下来的xis基因。3.右臂区，位于N基因的右侧，包括全部主要的调控基因（cⅠ，cⅡ和cro）,噬菌体的复制基因（O和P）以及溶菌基因（S和R）。 　 λ噬菌体主要的调节元件及调节基因产物的功能 调节元件或调节基因 产物及功能 PL,OL, PR,OR 左右向转录的启动子和操纵子 tR (1,2,3,4,5) 右向转录的终止子 tL(1,2) 左向转录的终止子 PRE? CⅠ蛋白建立启动子，受CⅡ蛋白调控 PI int基因启动子，受CⅡ蛋白调控 PaQ Q蛋白反义RNA启动子，受CⅡ蛋白调控 PRM CⅠ蛋白基因维持启动子，受CⅠ浓度调控 PR′ 晚期转录的启动子 nutL, nutR N蛋白左右两个反终止结合位点 qut Q蛋白反终止结合位点 cro PL和PR的阻遏蛋白，并可阻遏PE，抑制 CI? 表达 cI PL 和PR 的主要的阻遏物，并可自主调控PRM cⅡ 可以启动PRE 、PI 和PAQ，使λ进入溶原化途径 cⅢ 和CⅡ组成复合物，启动PE产生cⅠ及cro的反义RNA N tR1, tR2及tL1的反终止蛋白 Q tR4的反终止蛋白.? O, P DNA复制所需的蛋白 S, R, R2 裂解宿主所需的裂解酶 int 整合酶，使λ整合到宿主的染色体中 xis 切除酶，帮助λ在att位点和宿主连接 bet, exo 重组蛋白，帮助λ和宿主进行重组 W, B, N u3, C, D, E, FⅠ, FⅡ,Z 头部蛋白基因 U, V, G, T, H, M, L, K, I, J 尾部蛋白基因 cos (cohesive) 12bp的回文序列，由线状连接成环状的连接点，A蛋白切割位点 A 末端酶，识别cos位点，包装时将环连体切成单个的基因组 二．λ噬菌体转录调控 λ噬菌体的调控有多种形式，有正调节、负调节、自主性的反馈调节、抗终止调节、反义调节及反向调节等。λ噬菌体基因组中与调控有关的基因或位点集中在cⅡ 和cⅢ 之间,这一区域称为调控区。调控区内共有四个启动子：右向启动子PR，左向启动子PL 和另外两个左向转录的启动子PRE和PRM。左向和右向操纵基因OL和OR各由大约80个碱基对组成，每个操纵基因有三个结合位点，分别称为OL1，OL2，OL3和OR1， OR2， OR(如下图所示)。每一位点都有17个碱基对，3个位点的碱基顺序相似但不相同。CⅠ阻遏蛋白和Cro蛋白都能与操纵基因OL和OR结合。 在λ噬菌体发育中有两个可调控阶段，溶原化周期和裂解周期，而这两个周期是相互连系的。当λDNA进入新的宿主细胞时裂解和溶原化的途径并存。早早期和晚早期的基因都需要表达。然后就要分化了：若晚期基因得到表达那么就向裂解途径发育；若阻遏物CI蛋白合成被建立了，那么就要进入溶原化途径。在调节基因中，有早早期基因N与cro。它们是由不同的模板继转录的，N向左，cro向右，N反终止蛋白的存在使转录持续向前（穿过终止子）进入重组基因区；向右进入复制基因区以后，DNA末端相互连接形成了一个环状的DNA。晚期基因是作为单个的转录单位表达的，从位于Q和S之间的启动子PR′开始，此启动子是连续使用的。但当Q 蛋白缺乏时，晚期转录终止在tR3位点，产生了长194b的转录本，称为6S RNA。当Q蛋白存在时，它阻遏了tR3的终止和6S RNA的表达，结果晚期基因得到表达了。晚期的反终止的作用与N蛋白的反终止作用是相似的。pQ作用的qut正好位于晚期启动子的下游，RNA聚通过此处时，pQ与其作用消除了终止。晚期基因的转录并不在任何特殊位点终止，它转录所有的晚期基因，进入这些基因以外的区域。左边的