批式发酵法生产乳酸的几个重要因素.docxVIP

批式发酵法生产乳酸的几个重要因素劳含章,钱志良,王健,孙建荣(上海新立工业微生物科技有限公司,上海200231)摘要乳酸是一种重要的有机酸,在各个行业中均有广泛的应用,它作为生物可降解聚乳酸的原料尤其令人关注。本文对提高乳酸发酵生产中的几个重要因素如菌种、原料、工艺控制及其优化等作了简要探讨关键词:微生物菌种;乳酸生产;批式发酵;工艺概述乳酸发酵工艺中的几个重要因素的控制12乳酸是一种重要的天然有机酸。作为终端产品,乳酸在食品、饮料、饲料、现代医药、日用化工、造纸及电子等行业具有广泛的用途1,2。乳酸还是化学工业中重要的平台原料,除了制成乳酸盐、乳酸酯外,由于其分子的多官能性所赋予的反应活性,乳酸经催化可以生成乙醛、丙二醇、丙烯酸、戊二酮等重要化工原料3。更值得注意的是目前能够以乳酸为原料,合成可生物降解的新型环保材料———聚乳酸(PLA)4。由于上述乳酸衍生物生产技术的发展以及社会对各类乳酸衍生物产品的需求日益增加,可以预期在今后若干年内,世界范围的乳酸产量将会成倍增长1,2。就发酵产品而言,乳酸是低价产品,但为了开发其衍生产品,特别是PLA,则要求乳酸的生产成本越低越好,但相反要求乳酸的纯度越高越好,只有这样,制成的聚乳酸产品才能与当前由石油化工来源生产的不可降解塑料制品竞争,并取而代之。为了使乳酸生产成本下降,需要不断提高乳酸生产的技术水平,从乳酸生产工艺的多个环节不断挖掘潜力,提高效率。本公司多年来从事乳酸发酵的研究开发,成功执行了列为国家“十五”重点攻关的乳酸产业化项目。本文将结合积累多年的经验,从产业化角度就乳酸发酵中的几个重要因素,如菌种、原料、发酵控制条件及其优化等作一简要探讨。乳酸发酵是乳酸生产的关键步骤。发酵技术的优劣直接影响整个乳酸生产过程的效率。发酵技术主要包括发酵菌种的选择、培养基配方的设计、发酵原料及发酵方式的选择、发酵pH的控制方式及中和剂的选择、发酵工艺控制及优化技术等。因此,发酵技术是乳酸生产的第一道门槛。2.1菌种及菌种选育技术菌种是乳酸发酵的基本要素。优良菌种的选择和培育是乳酸发酵工艺技术的核心,也是随后下游放大完成工程设计的依据和出发点。采用不同的菌种类型将形成不同的工艺路线,导致不同的产品成本和产品品质。所以首先要选择好菌种。2.1.1菌种类别的考虑:真菌或细菌目前,乳酸生产菌种分为真菌(以米根霉为代表)和细菌(以乳杆菌属菌种为代表)。细菌发酵一般为同型发酵,即发酵产物为乳酸,不副产其他有机酸,同型乳酸发酵乳酸细菌经糖酵解途径代谢葡萄糖,从1个葡萄糖分子产生2个乳酸分子。细菌发酵的主要优势在于发酵产物纯度高,发酵糖酸转化率高;其次,细菌发酵能耗低,发酵所需无菌空气及发酵搅拌动力都很低;但细菌发酵也有一个明显的缺点,就是细菌发酵需在培养基中添加有机氮源营养物,这类营养物的加入直接增加了乳酸的生产成本,而且也增加了乳酸分离和纯化国家”十五”攻关项目(2004BA713B06-02)资助作者简介:劳含章(1956～),男,E-mail:gcb@—56—劳含章,等:批式发酵法生产乳酸的几个重要因素第3期第38卷的难度。根霉发酵是异型乳酸发酵,在发酵过程中会产生富马酸、琥珀酸、苹果酸、乙酸、乙醇等杂酸,降低了产物的化学纯度。2mol葡萄糖产生3mol乳酸。根霉是专性需氧菌,根霉发酵是好氧发酵,在发酵过程中需通气和搅拌、能量消耗大。由于传递限制,反应速率低,根霉发酵的转化率理论值只有75%,同时所产生的杂酸在提取过程中很难除去,降低了乳酸产品的纯度,严重时还会有白色沉淀产生。但根霉发酵亦有其自身的优点。如米根霉(R.oryzae)和少根根霉(R.arrhizus)具有糖化酶,能直接分解淀粉;另外,其培养基比较简单,只需添加少量无机氮。米根霉发酵产生的乳酸是单一的光学立体异构体:L2乳酸。我们曾选用米根霉作为乳酸的发酵菌种,从实验室小试、中试放大直至建厂,年设计生产规模达到2000吨。产品除供内销外,还有部分出口。在转向效率更高的细菌发酵以后,在实验室研究中,筛选出耐高温的优良菌种———嗜热乳杆菌(Lactobacillusthermophilus),顺利执行了国家“十五”关于L2乳酸85.0g/L,转化率为81.0%,发酵液中L2乳酸的纯度为99.3%。以上实例表明,从自然界中寻找乳酸高产菌种成功的机会很大,仍是非常有吸引力的菌种来源。乳酸菌的菌株改良经典的菌株改良技术是改良乳酸菌生产性能的重要手段。Demirci等14用甲基磺酸乙酯(EMS)处理产D2乳酸的德氏乳杆菌ATCC9649,得到耐酸能力增强、生产速率快、转化率高的DP3,产酸浓度可达117g/L。刘勇军等15以离子注入诱变技术对产L2乳酸的LB1细菌进行了有效处理,选得高产变异株LB121。有关常规诱变的乳酸菌种还包括干酪乳酸杆菌鼠李