三种提取柱状黄杆菌基因组dna方法的比较-河南师范大学.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BloTEcHNoLoGYBULLETlN 2012年第5期 三种提取柱状黄杆菌基因组DNA方法的比较 李莉李春梅谢旭阳 (河南师范大学生命科学学院，新乡453007) 摘要：采用酚氯仿抽提法、c‘rAB法和sDs．蛋白酶K法分别对鱼类病原茵柱状黄杆菌提取基因组DNA。使用超微量紫外 分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测所提取的基因组DNA的产量和质量，并用PCR扩增对DNA进行了评价。结果显示，3种方法 均可提取到柱状黄杆菌的基因组DNA．并能有效扩增细茵16s 以作为柱状黄杆菌DNA提取以开展分子生物学研究的首选方法。 关键词： 柱状黄杆菌 基因组DNA琼脂糖凝胶电泳PcR扩增 for DNAfrom ofThreeMethods Genomic Comparison Extracting j7饧l，D五口c船，Z巧刀zcD如玎咒玎口旭 LiLi LiChunmeiXie Xuyang 453007) (co洳酽矿￡咖＆拓，娜，胁删IⅣo丌Mf踟抽乃血y，崩脯彘mg Abst怕ct：1118 DNA惴训atedfmmfish chlomf抽I hcteria用删6∞捃矗帆c“删m阳by methI)d， genomic pathogellic phenol粕d cTABm劬c，fl卸d method．The concentrad蚰oftIIeDNAwemevaluaIedwith SDs—pmlea∞K quality帅d genomic andPCR 0fthe16srDNA．There8ult幽owedthat DNAc柚beobtainedthethree agar08egelelectrophoresiBamplmea虹0n genomic using dmrenI 16SrDNA fmm tlIeth眦methods．ButDNAextracted methodg，蛐d we弛8ucc鸭smlJy枷pli6eds锄plesex咖吲by lhe萨nomic 而tIlCTABmeth【，d}Iadthbf!st and CTABmethod啪sthebe9t衄et0 DNA0f凡口1106dc细i“m q岫lityyield．neref0『e，tlle gaint11e护nomic cof啪，Ⅺreforthe ofmolecutarlcvel． study words：胁tm6础^啪∞z“删忱即G咖0micDNA PcR Key Ag撇egelektrophoreBis 柱状黄杆菌(胁加6删e矗“玑cDZⅡm胍re)是一种无法用于分子生物学下游工作的研究。本研究以从 菌体细长、柔软的革兰氏阴性丝状菌，具有滑动能 患烂鳃病鲤鱼(铆珈吣c口巾幻)鳃部分离的柱状黄 力和团聚性，是世界范围内广泛分布的可以感染多 杆菌为试验材料，在参考前人工作的基础上将有关 种淡水鱼类的病原菌，由柱状黄杆菌引起的烂鳃病