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非洲菊基因组dna提取及issr!pcr扩增模板-计算机工程与科学
云 南 植 物 研 究 , ():
#4 AB 4 4’ D 444
#6+/ C0+/1,6/ D=11/1,6/
非洲菊基因组!# 提取及$%%!’( 扩增模板浓度优化!
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李宗菊 ,熊 丽 ,桂 敏 ,李金泽 ,刘小莉 ,刘飞虎
(云南大学生物技术系,云南 昆明 ; 云南省农业科学院园艺研究所,云南 昆明 )
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摘要:以改良的()*+ 法为基础,对非洲菊基因组,-* 提取进行了下述优化:在第二次用氯
仿 异戊醇抽提时,加入 “ ”溶液 ( , ),可明显去
. /(- 0$1% 2 /3/ 4% 5 6 ()*+ 7 4 6 -8(5
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除多糖;在材料研磨时加入化学物质 ( , )及 ( ,
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# ( =
0 2 -8 + ; , 0# 2 /3/,# 5 巯基乙醇),都可去除酚类物质,明显提高,-* 及
# 4 1 !
扩增的质量,但 的效果稍优于 ;同时加入 、 及 “ ”,具有明显的优化效
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果,所提 个样品 ,平均 、 分别为 、 ,浓度为 ,
% ,-* *#$.*#A *#$.*# 0A # 0# 0$4’ 2. 5
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片段大小约为4’ BC,?::@ 扩增带多且清晰、明亮、稳定性及多态性高,表明,-* 纯度很
高。对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明,所提 模板必须稀释 倍 (浓度为
,-* % D
E2. 5 时),才能扩增出清晰的谱带。
!
关键词:非洲菊;,-* 提取;模板浓度
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
F ’4$ * #% #1 #4 4 4’ $
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