hpv联合tct检查对不同级别宫颈病变hpv 感染状态患者的筛查意义研究.docVIP

精品论文 参考文献 HPV联合TCT检查对不同级别宫颈病变HPV 感染状态患者的筛查意义研究 魏晓芳 江苏省连云港市妇幼保健院　江苏　连云港　２２２００５ 　　【摘要】　目的　探讨HPV 联合TCT检查对不同级别宫颈病变HPV 感染状态患者的筛查意义.方法　选择我科收治的７２例CINⅡ~Ⅲ级患者,在治疗前进行HPV 感染率、基因亚型检测,以及TCT细胞学检测.结果　不同级别宫颈病变患者的HPV 阳性率、TCT异常率比较,差异无统计学意义(P＞０．０５)．所有患者中共计HPV 阳性者６７例,检出HPV 亚型１２种,所占比例最高者为１６型(５３．７３％),其次为５８型(２０．９０％)、３３型(１３．４３％),其中６７例HPV(＋)者中TCT正常者１２例,TCT异常者５５例;５例HPV(—)者中TCT正常者２例,TCT异常者３例.两者比较未见明显差异(P＞０．０５).HPV 与TCT检测均为阳性者的敏感性为７６．３８％,,高于其他检测结果的敏感???.结论　在对于不同级别宫颈病变HPV 感染状态患者的筛查中,应将年龄扩展至３０岁以下,HPV 多重感染可能是导致疾病进展的主要因素,故而HPV 联合TCT检测可起到较好的筛查作用. 【关键词】　宫颈病变;HPV 感染;基因分型;TCT检测;筛查【中图分类号】R７３７．３ 【文献标识码】B 　　【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－００６８－０２　　 　　宫颈病变属于妇科常见疾患,据相关统计学数据分析,全世界每年约有４９ 万新发病例,尤以宫颈癌居多,其中发展中国家的发病率已超过所有病例的８０％[１],且就我国而言,近年来宫颈癌的发病率不仅呈高发趋势,且发病年龄渐趋年轻化[２],故而世界卫生组织(WHO)指出,至２０２０年子宫颈癌每年新发病例可能达到７０万,而约９０％会发生在发展中国家[１],可见,对于发展中国家而言如何对于宫颈病变尤其是宫颈癌进行预防与诊断是需要解决的问题. 自上世界７０年代在宫颈癌的性传播疾病模型中高危型人乳头瘤病毒(HPV)的作用被提出后,越来越多的证据表明,感染HPV 是导致宫颈癌发病, 尤其是浸润性癌的核心因素[３],而对于宫颈病变的诊断,临床多采取细胞学、阴道镜以及组织病理学检查的三阶段诊断方法,但是由于后两者属于有创性检查,故而临床多不作为首选检测,而细胞学检查既往多应用巴氏法,但其假阴性率较高,而TCT作为一种液基细胞学检测产品,以其背景清晰,观察简单,漏诊率低的特点而渐趋应用于宫颈病变的筛查和预后病情评估[４],但两者结合对于不同级别宫颈病变HPV 感染状态患者的筛查有何意义,未见相关报道,因此,本研究对此进行探讨,以期对于临床有所裨益. 　　１　资料与方法 　　１．１　研究对象　将２０１４年１月~２０１４年１２月在我院就诊且经病理组织学确诊的７２例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者,根据宫颈上皮细胞不典型增生程度确定为Ⅱ~Ⅲ级并切缘为阴性的病历资料完整的患者作为研究对象,纳入本项目之中. １．２ 　一般资料　所有患者年龄２４~７６岁,平均(４１．９plusmn;３．６)岁;孕次:未孕者３ 例,已育者６９例,其中孕育１个者３４例,２个者２２例,３个及以上者１３例;民族:汉族者４８例,少数民族者２４例;分级情况:Ⅱ级者７例,Ⅱ~Ⅲ级者２２例,Ⅲ级者４３例. １．３ 　研究方法 　　１．３．１　HPVDNA 检测　标本均由我科医师经阴窥器暴露宫颈采集,采集前３d告知患者阴道内禁用药物及冲洗,前１d禁止性生活,将采集后的标本放入保存液小瓶,而后去０．５ml液体,离心弃上清液,采用人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒(PCR－反向点杂交法)(中山大学达安基因股份有限公司)对１３种常见高危型HPV 进行定量检测,将样本DNA 分解为核苷酸单链,与RNA 探针结合形成RNA－DNA 杂交体,并被标记有特异性单克隆抗体的微孔板捕获, 加入结合有碱性磷酸酶的多个二抗与RNA－DNA 杂交体结合,使信号放大, 将底物进行化学发光比色后通过检测标本的相对光单位值(RLUs)和阳性对照值(CO),用RIUs/CO 值表不待测的HPVDNA 的含量;采用凯普生物化学科技公司HPV 核酸扩增分型检测试剂盒同时对２１种HPV 亚型进行分型检测,首先利用QIA Mini试剂盒(购自德国QIAGEN 公司)进行DNA 提取,而后依次进行DNA 扩增、导流杂交以及滴入NBT/BCIP底物芯片进行显色,１h 内依据“TBS报告内容及标准”进行是否存在癌细胞核上皮内病变细胞、鳞状上皮细胞、腺细胞异常以及提示病原体感染的结果判读[３]. 　　１．３．２　TCT检测　采集宫颈鳞柱上皮交界部位及宫颈管内脱落细胞,采集过程中需采用新柏氏公司TCT 技术专用毛刷进行取材,同时使用TCT 专用制片机制