巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨.docVIP

精品论文 参考文献 巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨 务必论著栏目 巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠的急性毒性比较初步探讨 魏颖婕sup1; 史辑sup2; 1大连市中医医院药剂科（大连116013）；2辽宁中医药大学药学院（沈阳110032） 国家自然基金青年基金，编号[摘 要]：目的 为探讨巴戟天有无毒性、其毒性部位以及炮制对巴戟天毒性的影响，初步评价巴戟天的安全性，为其进一步药理研究提供参考，以期为巴戟天炮制减毒增效机理研究提供依据。方法 参照经典的急性毒性（LD50、MTD、MLD）试验方法 巴戟天主要的活性成分有蒽醌类、环烯醚萜类、多糖及低聚糖类以及有机酸类等化合物。近年研究发现，何首乌有小毒，其主要化学成分为蒽醌类，而巴戟天中亦含有大量的蒽醌类成分，但目前巴戟天是否有毒，其毒性成分尚不清楚，且研究较少。纵观历史，几乎所有的中药都要经过炮制加工过程，其目的是增强药效、降低或消除毒副作用，使其更适合临床用药要求。为探讨巴戟天有无毒性、其毒性部位以及炮制对巴戟天毒性的影响，本实验对巴戟天不同炮制品及不同提取部位进行小鼠急性毒性的比较研究，初步评价巴戟天的安全性，为其进一步药理研究提供参考，以期为巴戟天炮制减毒增效机理研究提供依据。 1 实验材料 1.1 实验动物 清洁级昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20plusmn;2)g，由辽宁长生生物技术有限公司提供，合格证号SCXK (辽)2010-0001。于标准条件下饲养，适应环境1周后开始实验。 1.2 药物与试剂 巴戟天饮片：巴戟天生品、巴戟天木心、生拨巴戟肉、巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天、水煮巴戟天按照2010年版《中国药典》所载制备方法以及本课题组优化的工艺进行制备。（见表1-1） 表1-1 巴戟天生品与不同炮制品 品种 生品处理与炮制方法 巴戟天生品 取原药材，除去杂质及木心，洗净，晒干。 巴戟天木心 取净巴戟天药材，拨出木心，将木心剪成小段干燥。 生拨巴戟肉 取净巴戟天药材，拨出木心，切段干燥。 巴戟肉 取净巴戟天药材，置蒸器内蒸透，趁热除去木心，切段干燥。 盐巴戟天 取净巴戟天药材，用2％食盐水拌匀，闷润，待盐水被吸尽后蒸透，趁热除去木心，切段干燥。 制巴戟天 取甘草煎汤，去渣，取净巴戟天药材，加药材量6％甘草汁同置锅内文火煮至甘草汁被吸尽，趁热除去木心，切段干燥。 水煮巴戟天 取净巴戟天药材，加入与甘草汁等量的清水同置锅内文火煮至清水被吸尽，趁热除去木心，切段干燥。 巴戟天醇提液：分别称取巴戟天生品、巴戟天木心、生拨巴戟肉、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟、水煮巴戟天，切成2-5mm左右的段，加入8倍量80%的乙醇溶液，回流提取3次，每次2 h，过滤，弃去药渣，收集滤液减压浓缩至无醇味，得浓缩液。浓缩液加适量蒸馏水成1.78 g/mL的巴戟天各炮制品提取液；另取一份巴戟天生品同法制得浓缩液，巴戟天生品浓缩液加适量蒸馏水混悬，依次用等体积乙酸乙酯、正丁醇各萃取三次，回收溶剂，得乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位，各部位提取物分别加适量吐温-80和蒸馏水稀释至1.78 g/mL。 辅料甘草汁：将甘草饮片加12倍量水煎煮1 h，过滤，药渣再加12倍量水重复煎煮2次，3次所得煎煮液合并制成浓度为6.3 mg/mL的溶液。 巴戟天药材购自广西、甘草药材购自大连开发区阳光大药房，经辽宁中医药大学鉴定教研室翟延君教授鉴定，巴戟天为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根；甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根及根茎。加碘精制盐(大连盐业有限公司，批号。 水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。 1.3 仪器 BS600-L电子分析天平（上海友声衡器有限公司）；腹腔注射器等。 2方法 2.1分组及给药 参照经典的急性毒性（LD50、MTD、MLD）试验方法[63]，进行巴戟天各炮制品及不同提取部位对小鼠急性毒性试验比较研究。经预试发现，各给药组无法测出半数致死量（LD50）和最大耐受量（MTD），故进行1日内最大给药量（MLD）试验。 将110只小鼠随机分为空白对照组和给药组(巴戟天生品组、巴戟天木心组、生拨巴戟肉组、巴戟肉组、盐巴戟天组、制巴戟天组、水煮巴戟天组、辅料甘草汁组、乙酸乙酯萃取组、正丁醇萃取组)，每组10只(雌雄各5只)。实验前禁食不禁水12 h，给药组1次灌胃给药15 mL/kg，3次/d；空白对照组给予等量的蒸馏水，11组小鼠连续给药7