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拉曼光谱在生命科学领域的应用 拉曼光谱作为一种无损、非接触的快速检测技术，已吸引广大科研人员的关注，并被应 用于各行各业中。特别是在生命科学领域，由于拉曼样品用量很少，不需要对生物样品进行 固定、脱水、包埋、切片、染色、标记等繁琐的前处理程序，不仅操作简单，而且不会损伤 样品从而能够获得样品最真实的信息。另外，生物大分子多是处在水溶液环境中，研究它们 在水溶液中的结构对于了解生物大分子的结构与性能的关系非常重要。由于水的红外吸收很 强，因此用红外光谱研究生物体系有很大局限性，而水的拉曼散射很弱，干扰小，而且单细 胞拉曼光谱能提供细胞内核酸、蛋白质、脂质含量等大量信息，可在不损伤细胞的条件下实 时动态地监测细胞分子结构变化，可以对细胞、病毒等进行原位检测分析。 HORIBA Scientific 共焦拉曼光谱仪因其灵敏度高、性能优越而被广泛用于生命科学领 域的研究，在诸如基础研究、生物医学、药物、化妆品以及食品中都有着广泛的应用。 1. 基础研究 基础研究包括组织结构及成分鉴别 （脂类、蛋白质、糖类、水、DNA ，RNA 等）、细胞 的定位、鉴别及分类等。 生物大分子中，蛋白质、核酸、磷脂等是重要的生命基础物质，研究它们的结构、构象 等化学问题以阐明生命的奥秘是当今极为重要的研究课题。拉曼是分子的 “指纹图谱”，生 物分子的指纹区主要出现在100-2000cm-1，如图1 左。拉曼对分子所处的环境非常敏感，结 [1] 构上的些微差异都能在拉曼谱图上体现出来，如图1 右 。 图1 左：甲状腺肿和恶性肿瘤的拉曼谱图；右：不同肌红蛋白拉曼谱图 细胞是生命最基本的组成，是一切生命现象的基 础。共聚焦显微拉曼光谱的发展对原位活细胞研究有 着重要意义，对于小尺寸的样品，如尺寸仅仅为1~2µm 的细菌，通过真共焦的良好共焦特性，依然可以对其 进行详细研究。如图2 即是对细菌做的三维拉曼成像， 图2 细菌的三维拉曼成像 可以清晰地分开微小的细菌 （感谢英国CEH Oxford 的Wei Huang 博士提供数据）。 另外，细胞种类繁多，如细菌有不同的菌种。通常，采用一些多元统计学方法，如聚类 分析、主成分分析、判别分析等可以更好地对研究对象进行评价。图3 是对3 种不同的细菌 在不同生长时间下获得的拉曼结果进行的统计分析，结果显示对于同一细菌，尽管生长时间 不一样，但是它们都被归属于同一类，证明拉曼可以很好地鉴别不同种类的细胞。 图3 多元分析对三种不同菌种的分类，其中a、 b 、c 分别代表三种不同细菌的训练数据，而粗