葡萄柚成熟果实气味对桔小实蝇雌虫的引诱及其化学成分.docVIP

葡萄柚成熟果实气味对桔小实蝇雌虫的引诱及其化学成分 申建梅 凌志强 陆永跃 陈炳翰 胡黎明 仲恺农业工程学院农业与生物学院 华南农业大学农学院 X 关注成功！ 加关注后您将方便地在 我的关注中得到本文献的被引频次变化的通知！ 新浪微博 腾讯微博 人人网 开心网 豆瓣网 网易微博 摘????要： 采用Y型嗅觉仪测定了葡萄柚成熟果实气味对桔小实蝇Bactrocera dorsalis雌成虫的引诱活性, 同时, 采用固相微萃取技术对葡萄柚成熟果实的挥发性物质进行收集, 并运用气相色谱-质谱联用技术 (GC-MS) 对其化学成分进行分析。结果表明, 葡萄柚成熟果实气味对桔小实蝇雌成虫具有明显的引诱作用, 挥发物主要成分为5种相对含量大于0.5%的烯类物质: (+) -柠檬烯 (45.52%) 、月桂烯 (4.09%) 、 (1R) - (+) -α蒎烯 (1.28%) 、β-石竹烯 (0.64%) 和萜品油烯 (0.61%) 。推测这些物质是葡萄柚成熟果实引诱桔小实蝇雌成虫的主要活性成分。 关键词： 桔小实蝇; 葡萄柚; Y型嗅觉仪; 固相微萃取; 气质联用; 作者简介：申建梅 (1979—) , 女, 博士, 副教授, 从事昆虫行为学研究。E-mail:shenjianmei12@163.com 作者简介：胡黎明 (1978—) , 男, 博士, 副教授, 从事昆虫行为学和化学生态学研究。E-mail:huliming98@126.com 收稿日期：2017-08-15 基金：广东省省级科技计划项目 (2014A020208129) Received： 2017-08-15 桔小实蝇Bactrocera dorsalis能取食40多科250多种水果和蔬菜[1-3]。其主要是以雌成虫产卵于果皮下, 幼虫孵化后直接取食果肉, 从而造成烂果和落果。目前对桔小实蝇的防治方法主要有诱杀和化学防治。化学防治不但存在环境安全和食用安全风险问题, 而且近年来桔小实蝇已对多种化学农药产生抗性, 致使防治效果下降[4-5]。诱杀主要使用类性引诱剂甲基丁香酚、水解蛋白和植物提取物等。其中, 常用的甲基丁香酚主要是引诱桔小实蝇雄虫, 并且甲基丁香酚还可能对生态平衡和哺乳动物健康有负面影响[6], 而根据桔小实蝇为害特点, 诱杀雌虫更利于控制其为害[7]。因此, 从寄主和非寄主植物的叶片或果实中筛选对桔小实蝇雌虫具有较高引诱活性的物质进而开发新型引诱剂受到广泛关注。植物挥发物在害虫搜寻寄主和产卵的过程中起着非常重要的作用[8]。已有研究表明, 多种果实挥发物对桔小实蝇雌虫具有引诱作用[9-10]。葡萄柚 (商品名西柚) Citrus paradisi, 属芸香科水果[11]。在生产中观察到, 成熟西柚对桔小实蝇雌虫具有明显的引诱效果, 说明成熟西柚挥发物中存在引诱桔小实蝇雌虫的化学物质。为探明成熟西柚对桔小实蝇雌虫具有引诱活性的挥发性物质, 笔者利用Y型嗅觉仪检测桔小实蝇雌虫对成熟西柚的行为选择反应, 利用固相微萃取技术对其挥发物进行收集, 运用气相色谱-质谱联用技术 (SPME-GC-MS) 进行分析。 1 材料与方法 1.1 材料 桔小实蝇幼虫采用人工饲料进行室内饲养。饲养条件为:温度 (27±1) ℃, 相对湿度50%~70%, 光周期L∶D=12 h∶12 h。选用饥饿处理的产卵期雌虫作为供试虫源。试验用成熟西柚购自市场, 洗净后将果肉和果皮匀浆后用于后续测试。 1.2 主要仪器 Y型嗅觉仪:由味源瓶、空气加湿器、活性碳空气过滤装置和Y型管组成, 各部件之间以硅胶管连接。嗅觉仪的2个侧臂长为20cm, 直管长30cm, 两臂夹角为75°。 气相色谱-质谱联用仪:TRACE GC2000/TRACE MS, 购自美国Thermo Finnigan公司。 顶空微萃取仪:由SPME手动进样手柄和75μm的CAR/PDMS微萃取头组成, 购自Supelco公司。 1.3 测定方法 1.3.1 雌虫对西柚气味选择的测定 采用Y型嗅觉仪测定桔小实蝇雌成虫对成熟西柚果实的嗅觉选择行为。测试时, 将嗅觉仪的一臂与置有一定量西柚果肉和果皮混合物的味源瓶相连作为处理, 另一端与空白味源瓶相连作为对照。测试时空气流量为200mL/min。从Y型嗅觉仪基管末端引入20头供试桔小实蝇雌虫。每次测试10min, 测试结束后进入某一测试臂成虫视为对该侧气味源有选择性, 停留在基臂的成虫视为未发生反应。分别记录进入两侧臂的桔小实蝇数目。利用上述方法, 分别测定桔小实蝇雌虫对不同剂量 (1、10和40g) 西柚 (果肉和果皮混合物) 的反应。每个处理10次重复, 每次测试后调换Y型管两臂方向, 以消除几何位置对桔小实蝇行为的影响。每作完一个处理, 立即用9