合成多肽药物中三氟乙酸残留物分析.pdfVIP

◎ 第十二届全国离子色谱学术报告会论文集福建厦门2008．11．5-8375 合成多肽药物中三氟乙酸残留物分析 陈磊1，马明扬2 1深圳翰宇药业有限公司，深圳518057 2瑞士万通中国有限公司技术支援中心，广州510070 摘要；三氟乙酸常用于多肽的合成、纯化过程，多肽药物中三氟乙酸含量是一项重要的监测指标。本文建 立了离子色谱法测定合成多肽药物中三氟乙酸残留含量的方法，获得了满意的结果。本法还可同时测定合 成多肽药物中乙酸根、氯离子、磷酸根、硫酸根等无机阴离子。 关键词：离子色谱：三氟乙酸；合成多肽 1前言 三氟乙酸(TFA)常用于多肽药物化学合成中，TFA也用于固相树脂洗脱出粗肽的反相 高效液相色谱纯化u~5。。TFA在多肽药物中具有双重作用。一方面，它具有较强的酸性， 与多肽药物结合可提高多肽药物的溶解度，并可提高多肽药物的稳定性；另一方面，TFA属 于酸性有机溶剂，在药典中属于四类溶剂，临床使用中存在毒性，因此在多肽药物中又不能 存在过多。所以，必须严格控制多肽药物中TFA。药典对四类溶剂尚无明确规定，通常按三 类溶剂的限度0．5％限定。因此，TFA含量测定是合成多肽药物的一项重要检测项目。同时由 于TFA与多肽的结合很稳定，无论是冻干或旋蒸都无法将其去除，所以转盐过程中TFA残留 和盐含量监测极其重要。TFA的测定可以用气相色谱．质谱联用睁刀，但样品处理麻烦、设备 成本高。本文建立了离子色谱法测定合成多肽药物中TFA残留量的方法，该方法简单易行、 结果准确、灵敏度高、设备成本低。本法还可同时测定合成多肽药物中乙酸根、氯离子、磷 酸根、硫酸根等无机阴离子。 2实验部分 2．1仪器及试剂 Metrohm792型离子色谱仪(瑞士万通)，MetroscpA5-250分析柱。 Compact Supp 三氟乙酸：Sigma色谱纯；Na2C03：基准，天津市化学试剂研究所；NaHC03：基准， 天津市光复精细化工研究所；溶液均用电阻率大于18Mr2超纯水配制。 2．2色谱条件 ASUPP Guard保护柱；流动 色谱柱：Metrosep5-250阴离子分析柱，MetrosepSupp4／5 相：3．2 mmol／LNa2C03／1．0mmol／LNaHC03；流速：0．7 mI．／min。进样体积：20皿， 2．3样品制备 称取一定量的样品，用纯水稀释，定容，用0．45¨m滤头过滤，进入色谱仪检测。 4结论 本文对离子色谱法测定合成多肽药物中的三氟乙酸的方法进行了探讨。测定表明， 该方法简单易行，专属性强，结果准确，灵敏度高，适合药物生产监控。并且在测定三氟乙 酸的同时，也可测定其它残留成份：乙酸根、磷酸根、氯离子，硫酸根等。 国 ＼j：；矿 第十二届全国离子色谱学术报告会论文集福建厦门2008．11．5-8376 2．4标准曲线 8．156 lO·195 c。nc(m∥L)4．078 20·3940．78l81．562Y=37·1938+r 硫酸根 Area 70．49 141．5 176．1 365．5 773．6 16780．961095X=O．9993 2．5标准混合物色谱图 图1标准溶液色谱图 3分析结果 样品制备液经0．45urn滤膜过滤后进入色谱仪分析，峰面积工作曲线定量。 参考文献： SJ．Useof to viral for toa 【l】Geysen嗍，MdoenRH，Barreling pcptidesynthesisprobe antigensepitopes resolutionofa aminoacid．ProcAcad Natl Sci l：3998 single