优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系的初步建立和实际应用研究.pdfVIP

· lO· ScienceResearch 生命科学研究Life 优劣环境交替性生物循环选育作用的 理论与技术体系的初步建立和实际应用 张德礼1，李衍达1，黄高升2，朱关福1，方福德3 (1．清华大学信息科学技术学院生物信息学教育部重点实验室，北京100084； 2．第四军医大学基础部，中国癌症研究基金会肿瘤学研究所，西安710032； 3．中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京100005) [摘 要]在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞种子库与工作库基础上，对研制生产犬五联 BHK一21)在700余只裸鼠进行了致癌(瘤)试验，并完成染色体变异率、克隆形成率、细胞凝集性 与肿瘤形成相关性研究。试验结果证明，水貂肠炎病毒(MEV)S-s和L。：株为制苗用毒株，L1。株为 检验用强毒株。建立了MEV组织培养的方法及高效价无血清MEV抗原大批量生产和检验的新 工艺。成功研制了安全有效的水貂病毒性肠炎(MVE)细胞培养灭活矿油苗和铝胶苗，并大批量常 年生产应用，特制高效苗免疫产生期为3～5d，免疫期与保存期均在9个月以上，免疫保护率高 这i00％。制定了MEV疫苗制造及检验规程。实验证明F_81和CRFK猫肾细胞系为亚二倍体核 型，不具有致癌性，可安全用于疫苗生产。该疫苗既可用于发生疫情时假定健康貂的紧急预防接 种，又可接种隐性感染貂和发病水轺。同时，应用敏感细胞系与钝感细胞系交替培育的方法，大 幅度提高MEV增殖滴度，获得最佳制苗毒株。筛选出高变异率上皮细胞系移植于裸鼠皮下，在 体内环境下快速选育出更高突变率细胞系，进而发育成MRT，确立了异类肿瘤的在体实验转化 现象。提出优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系。 [关键词]细小病毒；疫苗研制；安全性评价；交替选育；生物循环 Theoreticalandtechnicaloflaw system regarding recurrenceofselectionalternate biological by cultivation in and environmentsand advantagedisadvantage its ications practicalappl ZHANGDe-Lil，LIYan-dal，HUANG Guan—ful。FANGFu—De3 Gao-shen92，ZHU of ofState Bioinformaties ofEducation， (1．KeyLaboratory Ministry SchoolofInformationScienceand Technology，TsinghuaUniversity，Beijing100084，China； 2．SchoolofPre-clinieal of at Education，SectionPathologyXi—Jing Hospital， Institutefor atChina CancerResearch CancerResearchFoundatiort， Fourth Me