乙型肝炎病毒表面抗原定量检测的临床应用进展.docVIP

精品论文 参考文献 乙型肝炎病毒表面抗原定量检测的临床应用进展 广西来宾市妇幼保健院检验科 546100 【摘 要】乙型肝炎病毒表面抗原是乙肝病毒外壳蛋白主要成分，也是感染HBV病毒标志，当前在乙肝诊断中主要检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。HBsAg检测方法有很多，包括定性检测、定量检测、金标法，每一种方法都存在自身优缺点，下面主要综述乙型肝炎病毒定量检测应用进展。 【关键词】乙型肝炎；病毒抗原；定量检测；金标法 我国是乙型肝炎高发地区，乙肝病毒携带率达到10％，且南方高于北方[1]，临床HBV病毒不仅会引起肝炎，还可能引起细胞转化等，慢性乙型肝炎病毒肝硬化发生率较高，部分患者可能发展为肝癌，乙型肝炎检测有重要意义。 1乙型肝炎金标法检测应用进展 金标法是近几年建立起来的免疫学检测方法，在临床应用中，对每次酶联免疫吸附法检测出的阳性指标进行复查，金标法具有特异性高、快速、稳定等优点，无需特殊检测仪器，一般不会出现假阴性情况[2]，能够单份血清测定，检测时间短。但是在近几年使用中发现与酶联免疫吸附法检测相比[3]，金标法存在漏诊情况，灵敏度是重要原因。另外采血车的流动性也会影响到金标法的检测结果。 2定性检测和局限性分析 关于乙型肝炎发病机制，一般认为与机体免疫反应密切相关，血清学检测对乙型肝炎预防和治疗有重要价值。当前乙型肝炎病毒学血清标志物定性检测包括多种检测方法，包括免疫扩散法、免疫荧光法、酶联免疫吸附法、补体结合法等[4]，最为广泛应用的为酶联免疫吸附法，不少学者在研究中指出酶联免疫吸附法敏感性高于金标法，在实际工作中发现酶联免疫吸附法也存在自身不足[5，6]，灵敏性不高、特异性不强，存在前带、后带情况，无法正确和评估HBV浓度。 3病毒表面抗原定量检测应用进展 HBV病毒定量检测试剂盒最早在1972年出现，刚开始只能用于定性检测，到20世纪90年代，检测技术得到很大发展，病毒抗原检测领弥凝和特异性都得到提高。HBsAg最早定量检测技术以ng/ml为单位，并得到世界普遍认可，罗氏公司开发的检测技术，灵敏度可以达到0.05IU/ml，罗氏Elecysc定量检测扩大到52000IU/ml。除此之外当前定量检测还包括蛋白质芯片技术，这种检测方法定量检测价值更高，方法操作简单，能够通过软件计算抗原含量，适合患者疗效的观察。液相芯片检测技术只需要微量的样品便可实现定量检测，最高检测浓度达到32000pg/ml。 放射性免疫分析法是20世纪中期出现的免疫检测，以放射性核素标记抗原，加入到反应体系，检测标志物含量[7]，间接反应被检测物的含量。这种检测方法灵敏性和特异性都较高，但是存在放射性污染情况，而且操作过于复杂，临床已经很少使用。光激化学发光法以纳米级高分子颗粒作为技术，样本用量小，敏感性较高[8]，适合大量推广使用。在检测中，以纳米感光颗粒和发光化合物与待测检测样本结合，形成复合物，在激光灯照射下，能够释放高能态单线性氧，被R2中发光颗粒复活，释放高能量灯光，测定光子数量能够反应病毒浓度，检测下限达到0.2ng/ml。在临床应用中发现生物素结构类似物、维生素C等可能影响到检测结果。 化学发光定量检测是当前最常使用的定量检测方法[9]，以吖啶酯作为发光剂，样本中病毒表面抗原物与小鼠单克隆抗体相结合，加入标志物，启动化学发光反应，相对发光单位能够反应病毒表面抗体含量，检测极限在0.05~250IU/ml。 慢性乙型肝炎病毒感染分为三个自然周期，初始免疫耐受期检测阳性。HBsAg变化可以反应慢性乙肝的病程，血清学清除被认为乙肝治愈。采用HBsAg定量检测技术能够反应HBV复制活动情况，有学者针对无症状HBV携带患者[10，11]，检测HBsAg浓度，研究发现血清HBsAg浓度与DNA存在相关性，认为HBsAg可以用来反应病毒复制情况。采用定量检测技术也能够测定患者体内HBVDNA含量，研究显示肝组织HBVDNA含量与HBsAg定量相关。 采用HBsAg定量检测能够反应患者肝炎活动状态[12]，不少研究发现HBsAg定量分析与患者慢性感染有关，在免疫耐受期，HBsAg滴度稳定，慢性感染患者HBsAg含量较高[13，14，15]，可以认为处于免疫耐受期。针对HBsAg阴性患者，如果HBsAg定量检测在1000IU/ml以下可以认为处于免疫控制状态。 结语 随着乙型肝炎病毒表面抗原定量检测技术的发展，定量检测机制应用价值更高，当前定量检测已经成为预测乙型肝炎病毒进展重要检测方法，但是在临床中也发现