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体外3T3细胞光毒性中性红检测方法简介 郑赛华马来记林惠芬 上海家化联合股份有限公司技术中心上海市保定路527号，200082 neutralred invitro Detectionof Balb／c3T3cell assay photo-toxicityby SaihuaMa LinHuifen Zheng Lajji JahwaUnited 200082 Shanghai Co．，Ltd．，Shanghai 摘要：利用Balb／c3T3细胞体外培养技术建立光毒性检测方法，用来筛选光毒性物质具有经济、快速和 结果可靠等的优点。方法原理是物质在光照作用下直接或通过代谢产物对细胞产生毒性，利用细胞对生 物活性染料中性红的摄取能力，评价物质的光毒作用。本文介绍了方法的建立以及有关的质量控制因素 如细胞、光源、参比样品与待测样品制备等。 amethodtoevaluatethe of basedondetectionofneutralred Abstract：We present photo—toxicityagents by Balb／c3T3cellafter invitro．The of are and ultraviolet(UV)radiation assayeconomical，rapid advantages the the of areintroduced somerelativeelementsin control， reliability．Inpaperstepsassay including quality and tobe suchas of studied． cell，ultraviolet(UV)radiation，referenceagent agent preparation 关键词：Balb／c3T3细胞，光毒性，中性红检测 Keywords：Balb／c3T3 red cell，photo—toxicity，neutralassay 光照或光能作用下，可以发生两类毒性反应：光毒性反应和光变态反应。前者是指某些化学物质在 光能作用下增强对皮肤的原发性刺激，或发生结构变化产生新的具有皮肤刺激作用的物质。后者是指某 些化学物质在光能作用下通过机体的免疫机制，对皮肤产生由抗原与抗体介入的皮肤变态反应。 利用细胞体外培养技术建立相应预测或筛检光毒性物质的方法，具有经济、快速和廉价等优点，同 时也为国内化妆品行业逐步与欧盟或国际接轨，在替代整体动物实验方面积累更多的经验上具有积极意 义。 1．实验原理 许多类型化学物质可以引起光毒性反应，其简单的特征为能够吸收阳光中的能量。根据光化学和光 反应的第一定律，要求能够充分地吸收光量子。因此，在进行生物学实验之前，必须确定化学物质的紫 外线吸收光谱。如果这种物质的摩尔消光系数／吸收系数小于10L／mol·cm，那么这种物质则没有潜在的 光反应，同样不必进行体外3T3光毒性实验，以及其他光化学毒性反应的生物学实验。 正常状态下，细胞能够吸收生物活性染料(如中性红)，当细胞受到损伤后，吸收生物活性染料的 能力降低；细胞膜受到伤害后，吸收的生物活