单克隆抗体PPT课件..pptVIP

单克隆抗体的应用 一、单克隆抗体技术在天然药物研究中的应用 单克隆抗体问世以来，它在临床治疗疾病方面发挥了重要作用，尤其是在肿瘤治疗方面。随着人们对单克隆抗体认识的深入，这一技术被逐渐应用到食品、转基因动物和植物、植物病毒学等方面，但在天然药物研究领域中的应用国内鲜有报道。以单克隆抗体为基础的酶联免疫分析法以其灵敏、精确、迅速和简便等特点,可用于天然产物活性成分的检识与含量测定，另外还可用于天然药物有效成分的分离与纯化、药物代谢动力学研究、质量监控、新药筛选以及扩大药用植物资源，对于天然药物的开发和利用、加速中医药现代化的进程有着重要的意义。 自上个世纪70年代中期英国科学家Kohler和Milstein成功建立了单克隆抗体技术以来，单克隆抗体技术得到了飞速的发展，这一技术在生物学和医学研究及临床上得到了普遍的应用, 并发挥了重要的作用。从鼠源单抗之后，单抗历经了嵌合抗体、人源化抗体、人源性抗体3个发展阶段。近年来随着分子生物学和细胞生物学的发展，单克隆抗体的应用已日益普及，单抗理论几乎应用到生物学研究的每一个领域。单克隆抗体在临床上主要是应用于治疗肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病等。 除此之外，还应用于动物、植物等转基因方面的研究。建立在单克隆抗体基础之上的定性、分离、分析检测技术, 如免疫沉淀技术、免疫荧光技术及胶体金技术等, 在科学研究、临床及生物制品生产过程中都发挥着重要的作用，这一技术也将是天然药物研究中的重要手段。 1.1 单克隆抗体在天然药物活性成分定性定量分析中的应用 药物作用的物质基础是化学成分，成分的有无及多少决定药物的疗效，现有天然药物定性定量的方法多为色谱法、光谱法、容量分析法等物理化学方法。与之相比，利用单克隆抗体技术的免疫分析具有灵敏度高、特异性强、前处理简单、易操作、反应速度快、检测费用低、适于现场监控和大批量样品分析等优点，广泛而迅速的触及生命科学的各个领域，亦已 步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业。 免疫分析法不仅可用于测定蛋白质、酶等大分子物质，而且还广泛用于测定小分子量的药物，特别适用于那些色谱法难以分析的药物，它已成为药物分析中一种必不可少的基本检测技术。 单克隆抗体在天然药物活性成分定性定量分析的主要应用： 一是用于活性成分检识和定量测定； 二是用于毒性成分的检识，其毒性成分包括内源性和外源性毒性物； 三是用于农药残留物的检识； 此外还可用于药物代谢动力学研究，一些容易出现不良反应药品如抗凝剂福斯高（forskolin）和异喹啉生物碱黄连（isoquinolinealkaloid coptisine），测定其血清和尿液中的代谢物水平，可为临床安全用药提供指导。 1.2 单克隆抗体在天然药物成分分离中的应用 Xu J S等用甘草皂甙的单克隆抗体制备免疫亲和分离柱一步就得到了高纯度的甘草皂甙。我国学者利用免疫亲和柱分离出党参、桃仁、神曲中的黄曲霉毒素，并对其进行了含量的检测，以便控制天然药物中的有害成分及含量。随着科学的发展进步，免疫分离柱的应用也将推广到天然药物的工业化生产上来，以促进高质量天然药物的产业化、标准化生产。 1.3 单克隆抗体在药用植物分子育种及培育方面的应用 将天然药物单克隆抗体功能性的单链抗体可变区基因片（scFv）导入到大肠杆菌或病毒等载体内后，得到一个重组体，再将重组体导入植物细胞进行培植，就可以得到活性成分高富集的天然药物。 1.4 单克隆抗体在样品筛选中的应用 有人利用单克隆抗体的ELISA技术来检测多种不同药用植物中是否含有小檗碱，筛选出可用于临床的药用植物来进行植被，发现黄连素种属新的替代品，找到含黄连素较高的新药源。也有学者利用青蒿素的单克隆抗体来筛选出高含量青蒿素的植物种类来进行栽培。最近报道利用单克隆抗体技术定量分析不同季节西洋参的浆果和花中人参皂甙Rb1，Rg1and Re的量，发现含人参皂甙最高的西洋参并确定其收获季节。此外，单克隆抗体技术的免疫分析技术还可用于实验室植物组织培养过程中的成分检测，从而获得其培养物成分含量符合标准水平的样品。 1.5 展望 近年来已经有不少关于中草药中含有毒性成分报道，盲目的服用或是过度服用会对人体造成伤害，制备其毒性成分的单克隆抗体来中和其毒素，将在临床治疗上有广阔的应用前景。天然药物按规定的标准方法制备其提取物, 可制备中药材质量抗体芯片用于鉴定药材的科、属、种及其所含成分，建立中药材质量标准。按其制定相应成分含量的质量标准，可进一步制备出其活性成分检测的ELISA试剂盒，可以快速、敏感、全面鉴定中药材质量。单克隆抗体技术为天然药物的研究方法提供了更多的选择。 二、单克隆抗体在食品安全和临床中的应用 单克隆抗体问世后取得了广泛