开展原位杂交技术可行性报告(FISH).doc

荧光原位杂交技术-FISH 可行性报告 ******医院 FISH的发展前景……………………………………………..1 FISH的原理…………………………………………………..1 FISH的技术特点……………………………………………..1 开展FISH的重大意义……………………………………….2 FISH在临床中的应用及操作程序…………………….…….8 FISH项目给社会及医院带来的效益…………………….…11 公司简介……………………………………………….……..14 售后服务……………………………………………….……..15 开展荧光原位杂交（FISH）检测项目 一．FISH的发展前景 随着医疗水平的整体提高，“个体化诊断”、“分子诊断”和“靶向治疗”受到愈来愈多的重视。 以荧光原位杂交（FISH）为代表的分子细胞遗传学技术近十几年来已从基础医学研究广泛地转向临床医学检测领域。由于技术本身操作简单，重复性好、具有较高的灵敏性及特异性，因此很适应于临床医学检测。在美国，FISH探针已被FDA列为“特异性分析试剂”，不需批准即可用于临床医学检测。FISH已成为一种常见检测手段，广泛地用于产前、产后遗传病诊断及血液肿瘤、实体瘤等方面的检测。被FISH检测的样本种类较多，可以是羊水、绒毛、流产组织，也可以是外周血、骨髓、体液及各种肿瘤组织等。 在中国，近几年FISH已经得到了越来越广泛的应用，尤其在血液病诊断、产前诊断和实体肿瘤检测方面。 二．FISH的原理 原理：以核酸碱基互补配对原则为基础所发展出来的检测技术,主要是利用DNA序列的互补性,通过荧光标记的DNA探针与预处理的待测样本的DNA进行原位杂交，在荧光显微镜下, 对荧光信号进行辨别和计数，即可对细胞、组织样本中的染色体或基因异常进行检测和诊断 三. FISH的技术特点 FISH技术具有以下几个方面的优势： 操作简单－拥有离心机、水浴锅等常规仪器即可完成实验 所需人工少－整个流程中人工操作时间在2-4小时之间 结果报告快－常规FISH项目中基因或者染色体检测通常24小时内得到结果 结果直观－结果观察只需在荧光显微镜下判断信号的数目即可，无需人员特殊培训 四．开展FISH的重大意义 鉴别诊断 指导临床用药，指导临床用药方案选择，筛选靶向药物适用者。 判断预后指标，疾病风险预测。 辅助病理科病理分级 监测治疗效果 产前快速诊断 五：FISH在临床当中的应用及操作流程 1：在乳腺癌中的应用 1) 检测项目：HER-2/neu基因、17号染色体数目 在乳腺癌诊断和指导用药方面,FISH显示出极强的优势。 乳腺癌是严重危害妇女生命最常见的恶性肿瘤，寻找有效的治疗手段一直是肿瘤学研究的重要方向。大约25-30%的乳腺癌有HER-2/neu基因扩增，一般来说，HER-2/neu扩增与乳腺癌预后差相关。Herceptin是一种针对HER-2/neu异常扩增的靶向治疗药物，能特异性地抑制具有HER-2/neu癌基因扩增的癌细胞的生长，使病人预后大大改善。HER-2/neu扩增是决定Herceptin使用的关键性指标，而检测HER-2/neu的金标准即为FISH。 目前临床中检测HER-2扩增情况主要是应用免疫组织化学方法和FISH方法。 免疫组化方法属于病理科常规检测项目，价格低廉，但是对于靶向药物治疗来说，蛋白水平的检测不能完全替代基因检测。主要是在两个方面： 免疫组化结果评判需要人工主观判定，对于1＋、2+结果存在不明确的可能， 关于内参照，鉴于免疫组化技术本身特点，无法在一次实验中，同一样本上进行两个指标的检测，此种检测可能会因为17号染色体的非整倍现象而导致错误的结果。 FISH优势： FISH结果判定是在荧光显微镜下观察荧光信号数目，不存在主观原因， FISH可以同时检测17号染色体数目，避免由于17号染色体发生异常而导致的错误结果判定。 目前比较公认的HER-2基因检测是按照以下流程进行： 下图是标准结果图，红色信号代表HER-2基因，绿色信号用于检测17号染色体数目，当红色和绿色信号数目比值大于2.2时即可判定为HER-2基因异常扩增。 2) 乳腺癌患者TOP2A基因的检测： TOP2A基因异常的乳腺癌患者对于含蒽环类药物的治疗方案更为敏感： 临床研究的试验表明,如果患者存在TOP2A基因异常，相对于使用CMF方案来说，使用CEF方案的病人拥有更长的无复发生存期（RFS）及总生存期（OS）。TOP2A 基因异常的病人可以明显受益于含有拓扑异构酶抑制剂的辅助化疗方案。TOP2A扩增的病人使用CEF方案进行治疗可以降低61%的复发风险和51%的死亡风险，而没有TOP2A扩增的患者使用CEF方案只能降低6%的复发风险