保定市绝经女性载脂蛋白E基因多态性与冠心病合并脑梗死遗传易感性的关系研究.docVIP

精品论文 参考文献 保定市绝经女性载脂蛋白E基因多态性与冠心病合并脑梗死遗传易感性的关系研究 程华1 顾莹辉2 王秀娟1 (1河北保定市第三医院 071000；2河北保定市第二医院神经内科 071000) 【摘要】 目的 检测并分析保定市绝经女性中载脂蛋白E(apoE)基因多态性与冠心病合并脑梗死遗传易感性的关系。方法　采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法，分析 96例绝经女性冠心病合并脑梗死患者和86例绝经女性的健康对照者的apoE的3种等位基因epsilon;2、epsilon;3、epsilon;4，做基因频率和基因型多态性分析。结果　健康人群组apoE基因呈多态性，有6种基因型，即3种纯合子（epsilon;2/2、epsilon;3/3、epsilon;4/4）；3种杂合子为（epsilon;2/3、epsilon;3/4、epsilon;2/4）。与绝经女性的健康人群组比较，绝经女性冠心病合并脑梗死组epsilon;3/3基因型频率较健康人组明显降低，差异有统计学意义(Plt;0.05)，epsilon;4/4、epsilon;3/4基因型频率较健康组明显升高，差异有统计学意义(Plt;0.05)，epsilon;2等位基因频率较健康组差异无统计学意义(Pgt;0.05)。结论　保定市绝经女性的健康人群组apoEepsilon;3基因出现率最高，epsilon;2和epsilon;4频率较低，epsilon;3/3基因型最多，而epsilon;2/2、epsilon;4/4相对较少，绝经女性的冠心病合并脑梗死患者中epsilon;3/3、epsilon;2/3基因型频率较低，epsilon;4等位基因频率在绝经女性的冠心病合并脑梗死患者中增高，epsilon;4可能是冠心病、脑梗死的遗传易患因子之一，epsilon;3等位基因是冠心病和脑梗塞的保护因子。 【关键词】 绝经女性 冠心病合并脑梗死　载脂蛋白E类　多态性　疾病遗传易感性 心脑血管疾病是目前死亡率位居首位、严重危害人类健康的疾病，其中冠心病和脑梗死的发病率较高。女性在绝经后失去了雌激素对心脑血管的保护，导致动脉粥样硬化进展迅速，患冠心病、脑梗死的风险显著增加。冠心病和脑梗死，二者共同的病理基础和主要发病因素之一是动脉粥样硬化。动脉粥样硬化形成受多种因素的影响，其中脂质沉积发挥重要作用。载脂蛋白E（apoE）是血浆中主要载脂蛋白之一，具有多态性，参与机体脂质代谢及调节胆固醇平衡。有关apoE基因多态性与冠心病和脑梗死的研究较多，结果不一致。为此我们采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术，结合DNA银染技术检测apoE基因多态性，研究保定市绝经女性人群中apoE基因型的频率及分布，探讨保定市绝经女性人群apoE基因多态性与冠心病合并脑梗死发病风险的关系。 一、 资料与方法 1、 临床资料：所有资料均选自2007年3月至2009年2月在保定市第三医院体检的健康绝经女性及冠心病合并脑梗死的绝经女性患者182例，均为无血缘关系且在保定市生活30年以上的汉族人。（1）健康人群组：从健康体检者中随机抽取86例，均为绝经女性，平均年龄（57plusmn;10）岁：入选标准：既往身体健康、排除有阿尔茨海默病、脑血管病、心肝肾疾病、糖尿病、血液病、自身免疫性疾病、甲状腺疾病。（2）冠心病合并脑梗死组：在保定市第三医院就诊的经临床诊断为冠心病合并脑梗死的住院患者96例，均为绝经女性，平均年龄（58plusmn;10）岁；冠心病入选标准：符合1979年WHO的冠心病诊断标准[1]，并排除糖尿病、肝肾疾病、老年性痴呆症等。脑梗死入选标准：符合1995年全国第四届脑血管病学术会议的诊断标准[2]，并经头颅CT或MRI确诊；排除心源性、动脉炎、脂肪栓子、药物、肿瘤等引起的脑梗死。以上两组年龄、性别差异无统计学意义(P＞0.05)。 2、采血：全部为抽取晨起空腹12-14小时抗凝静脉血3ml。采用NaCl盐析法提取基因组DNA，-20deg;C保存。 3、试剂配置及来源：抗凝剂，DNA提取试剂，红细胞裂解液（军事医学科学研究室提供），TE缓冲液，储存液SDS，蛋白酶K（Sigma公司提供），PCR试剂：4种dNTPs（Sigma公司提供），引物：上游引物序列5-AACAACTGACCCCGGTGGCG-3和下游引物序列5-ATGGCGCTGAGGCCGC GCTC -3反应引物按文献[3]设计，由中山医科大学基因中心合成。10%二甲基亚砜，TaqDNA聚合酶（Sigma公司提供），10倍PCR缓冲液。电泳试剂：2%琼脂糖凝胶、限制性内切酶HhaI（Sigma公司提供）、限