bFGF在实验性糖尿病大鼠结状神经节中的作用及该神经节超微结构的研究.docVIP

精品论文 参考文献 bFGF在实验性糖尿病大鼠结状神经节中的作用及该神经节超微结构的研究 高尚1 丁丽宏2 李筱贺1 王志强1 马界荣1 张琪1（1内蒙古医科大学基础医学院解剖教研室 010051；2内蒙古医科大学附属医院 010051） 【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）50-0206-03 【摘要】 目的 探讨bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）在糖尿病神经病变（DNP）中的作用，为临床提供糖尿病神经病变的形态学依据。方法 所有大鼠给予链脲佐菌素（STZ）60mg/kg腹腔注射，72小时后测尾静脉血糖，血糖ge;16.7mmol/L且稳定2周以上者纳为糖尿病模型。在电子显微镜下观察结状神经节超微结构，用免疫组织化学的方法检测bFGF的表达。结果 电子显微镜下发现糖尿病神经病变时细胞胞质内线粒体肿胀、溶解、嵴断裂；高尔基体成熟面肿胀；内质网肿胀，明显扩张。细胞核内内质网明显扩张??尼氏体边集。糖尿病大鼠较正常对照组大鼠结状神经节细胞胞浆bFGF表达增强。结论 糖尿病时大鼠结状神经节超微结构发生变化，胞浆bFGF表达增强，可能是机体的一种抗损伤反应，bFGF对糖尿病神经病变时的神经元具有修复作用。 【关键词】 大鼠 糖尿病神经病变 超微结构 碱性成纤维细胞生长因子 糖尿病（DM）是由于胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗所致的一组代谢性疾病，并发症可影响全身重要器官。糖尿病神经病变（DNP）是糖尿病最常见的并发症以及是病人致残的主要原因之一，出现时间较早，给病人带来极大的痛苦，严重影响患者的生活质量和危及生命健康[1]。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF），是一类多功能的多肽生长因子，它与神经系统的生长发育有十分密切的关系。碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）能促进体外培养大鼠海马、皮层隔、丘脑神经元的存活和突起的生长，以及脊髓神经元（鸡胚）的存活[2，3]。在病理情况下细胞因子的异常表达多与系统或器官疾病的产生、发展密切相关。本实验通过对糖尿病大鼠结状神经节形态结构的观察，检测结状神经节中bFGF的表达，探讨细胞因子bFGF对糖尿病周围神经系统功能障碍的发生、发展的影响，为糖尿病周围神经系统功能障碍的发病机制和治疗提供一定的形态学理论依据。 1.材料与方法 1.1实验动物模型及分组 选用雄性健康SD大鼠25只，体重160g-180g，随机分为2组，对照组10只，模型组15只。将链脲佐菌素溶解于0.1M PH=6.0枸橼酸盐缓冲液，配成2%新鲜的链脲佐菌素（STZ）溶液，滤菌器除菌，以60mg/kg剂量一次性腹腔注射。正常对照组用等量生理盐水腹腔注射。选择注射STZ后72小时尾静脉取血测血糖，血糖ge;16.7mmol/l，尿量以及饮水量明显增多者列入糖尿病实验大鼠模型，本组有13只造模成功。期间动物统一笼养，喂以基础饲料，自由进水，不进行胰岛素注射治疗，每两周测体重和血糖。 1.2标本收集及检测方法 饲养8周后所有的大鼠称取体重，均禁食水10小时，尾静脉取血测血糖。动物处死前5%乌拉坦腹腔注射麻醉（1.0ml/100g体重）。在颈部正中线处，作4cm切口，借助外科手术显微镜，找出左右侧颈动脉鞘，并仔细分离出迷走神经，至颅底颈静脉孔即迷走神经离开颅腔处，立即取左侧结状神经节制备电镜标本，右侧结状神经节固定于4%多聚甲醛中固定,常规脱水、石蜡包埋、切片,采用免疫组化染色,观察结状神经节bFGF表达(bFGF试剂盒购于Sigma公司)。细胞质内见染成棕黄色颗粒的结状神经节细胞,认定为表达阳性细胞。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图像分析系统,在400倍视野下每张切片取5个视野,测定平均灰度值作半定量分析,用以反映其蛋白表达水平。 1.3.统计学分析 采用SPSS16.0统计软件进行统计分析,所有数据均用-xplusmn;s表示,对所测结果进行正态性及方差齐性检验,组间比较采用单因素方差分析。 2.结果 2.1实验组大鼠注射药物后，整体状态差糖尿病大鼠组较正常对照组明显体重减轻，大鼠出现多尿、多饮、多食症状,行动迟缓，精神萎靡不振、体毛发黄、稀疏、掉毛，反应迟缓等症状, 血糖值与正常对照组比较维持在（gt;16.7mmol/l）水平（体重及血糖见表1和表2）。 表1 对照组与糖尿病组体重（克）值比较 组别 0周 2周 4周 6周 8周 对照组 179.17plusmn;9.25 2