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蛋白质纯化技术在农业研究中的应用
孙文改 Meets the Pace of
Tomorrow’s
Process
Wen-gai.sun@
Development
Needs
农业研究中的蛋白质纯化
植物蛋白提取与其互作的研究
农业养殖中病毒的防治和研究
植物总有效成分的医用价值的研究
农产品加工过程的品质影响研究
植物生长特性的研究（植株抗冻蛋白等
环境胁迫作用对植物生理的影响
农业植物抗病蛋白药物的筛选
营养代谢中功能性酶的分离与纯化
禽类疾病相关蛋白的研究
新型饲料开发中酶组分的功能性研究
植物病程中差异蛋白的寻找
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26/05/2010
例一：蓖麻毒素纯化
作用机理：蓖麻毒素( ricin)是从植物蓖麻子中分离得到的一种Ⅱ型
核糖体失活蛋白, 由仅通过一个二硫键相连的A链(RTA)与B链(RTB)组
成, 为糖基化的球形异二聚体结构。RTB (Mr 34 000)是一种具有半乳
糖或N2 乙酰半乳糖胺结合活性的凝集素蛋白。Ricin经由RTB介导的
逆分泌途径进入细胞质到达内质网, 发生二硫键断裂使两条链分离, 并
使RTA重折叠为活性状态 。RTA (Mr 32 000)具有RNA N2糖苷酶活性,
可以使大鼠细胞28 S rRNA在S/R结构域第4324位上脱去保守的腺嘌呤,
阻止其与延伸因子2 的结合, 从而阻断蛋白质合成途径引起细胞死亡。
应用：肿瘤细胞凋亡、抗癌免疫毒素、生物农药如灭鼠、杀虫等
中药材2009，32 （5 ）
细胞与分子免疫学杂志2005，21 （2 ）
中国农学通报2004，20 （4 ）
生物技术2005，15 （5 ） 3 /
26/05/2010
天然蓖麻毒素的纯化流程
制备蓖麻粗毒
Sepharose 4B酸化处理亲和层析
Sephacryl 100(S-200/Sephadex G-100)凝胶过滤
纯度测定95.3％和免疫印迹鉴定
蓖麻毒素纯品
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26/05/2010
步骤一：粗提液的准备及预处理
取去壳蓖麻籽50g,在预冷的研 取去壳蓖麻籽50g,在预冷的
磨中研碎. 研磨中研碎；
加入石油醚100ml,磁力搅拌脱
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