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7500U/kg,3750U/kg均能显著延长小鼠全血凝血时间;NK5000U/kg能
显著延长兔血液凝19系统PT,APTT(P0.01),TT(P0.05);显著降低兔
血液FIB含量((P0.01);2500U/kg能显著延长兔血液凝固系统PT,
APTT(P0.05)，显著降低兔血液FIB含量((P0.01).
关键词:纳豆激酶，分离纯化，理化性质，纤溶活性
Abstract
ThisthesisdealswiththeinvestigationofNattokinase困K),anaturalfermented
productwithstrongfibrinolyticactiviyt.Includes,
Part1:TheseparationandpurificationofNK.Usingammoniumsulfate,wemainly
studiedtheextractionresultsofNKwithdifferentsolventsanddifferentextractmethods.
wealsochoseaappropriaterangeofammoniumsulfatesedimentation,soapreferable
extractionmethodswassetup.Atthesametimewecompareddifferentmethodsof
activitydetermination.Allthisabovehadlaidabaseforthefartherstudy.Theresult
suggestedthatsalineisprefertoPBbuffer(pH7.4)asaextrationsolvent,andextracting
directlyfor1.5hourswithoutanyotherprocessingcouldmaketheextractionalmost
completely.The(NH4)2SO4wasfirstlyaddedto25%saturationtogetridofsomemixed
protein,thento75%saturationtoprecipitateNK,whichhadahighestparametervalue.
Inactiviytdetermination,thetwomethodsCLTandFibrinPlatewerecompared.We
improvedthedeterminationmethodaccordingtotheprincipleofCLT.Theresultmade
itclearthatCLTwasfasterinthedeterminationspeedandhadabetterresolutionthan
fibrinplate,butcouldonlybeusedincrudeenzyme.Withthesensitiviytrising,itwas
moreandmoredifficultlytojudgethedissolvetime.Becausefibrinplatewasrelatively
directandconvenient,soitwasusedasactiviytdeterminationmethodinour
experiment.
Parttwo,Investigatingthephysico-chemicalpropertiesofNK.Thispartmainly
inspectedtheenzymeactiviytinfluencedbydifferenttemperature,pH,heatpreservation
time,andmadeapreliminaryinvestigationofNK.TheresultshowedthatNKcould
keepitsenzymeactivitystablerelativelyattherangeof25.45CandpH4-12,andin
pH7-9theenzymeactivitywasmostlystable,after24hourstheresidualenyzme
activitywaskeptabove95%underthiscondition.Whenstoringbelow370C,this
班
enzymewasstableand
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