株耐热纤维素酶产生菌的筛选及其酶学特性-江苏农业科学.PDFVIP

— ２７２— 江苏农业科学　２０１７年第４５卷第２０期 金　伟，陈文静，缪礼鸿，等．１株耐热纤维素酶产生菌的筛选及其酶学特性［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（２０）：２７２－２７４． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．２０．０６７ １株耐热纤维素酶产生菌的筛选及其酶学特性 金　伟，陈文静，缪礼鸿，刘蒲临 （武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北武汉４３００２３） 　　摘要：采用富集培养并结合滤纸条降解法进行初筛，从土壤中分离到１株产纤维素酶能力较强的耐热真菌ＸＴ３。 通过菌株的形态特征和１８ＳｒＤＮＡ序列同源性比较，该菌株被鉴定为烟曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）。发酵试验表明， ＸＴ３菌株产酶培养的最适起始ｐＨ值为４．０，最适产酶发酵温度为４５℃；该菌株产生的羧甲基纤维素（ＣＭＣ）酶和滤纸 酶的最适作用温度分别为８０、７０℃，具有较好的耐热性、耐酸性。此外，研究还表明，ＸＴ３菌株能够较好地利用木薯酒 糟液发酵产纤维素酶，在木薯酒糟液培养基中添加２％麸皮可使发酵液的纤维素酶活性提高２．１倍，表明该菌株具有 潜在的应用价值。 　　关键词：纤维素酶；烟曲霉；耐高温真菌；筛选；木薯酒糟培养液 　　中图分类号：Ｑ９３９．９６；Ｓ１８２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１７）２０－０２７２－０３ 　　纤维素是地球上最丰富的生物质资源之一。纤维素的降 ２０ｇ琼脂，加蒸馏水至 １０００ｍＬ，调节 ｐＨ值为４．０～５．０。 解由内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶、 －葡萄糖苷酶协同完 （３）复筛液体培养基：１０ｇ羧甲基纤维素钠，４ｇ（ＮＨ）ＳＯ， β ４ ２ ４ 成。纤维素酶在微生物中广泛存在，但是微生物所产纤维素 ２ｇＫＨＰＯ，０．５ｇＭｇＳＯ ·７ＨＯ，０．５ｇＭｎＳＯ，加蒸馏水至 ２ ４ ４ ２ ４ 酶的热稳定性往往并不理想，绝大部分真菌纤维素酶的最适 １０００ｍＬ，调节ｐＨ值为４．０～５．０。（４）ＰＤＡ培养基：２００ｇ马 ［１］ 反应温度一般为５０～６０℃ 。耐热酶在工业应用中具有许 铃薯，２０ｇ蔗糖，２０ｇ琼脂，加蒸馏水至１０００ｍＬ，ｐＨ值自然。 多突出的优点，嗜热微生物及其产生的耐热酶一直是国内外 （５）滤纸条崩解培养基：１．５ｇ牛肉膏，１．０ｇ蛋白胨，２．０ｇ ［２－３］ 的研究热点之一 。 ＣａＣＯ，加蒸馏水至１０００ｍＬ。每个试管分装成高７ｃｍ深层， ３ 木薯酒糟利用的是木薯生产乙醇后的残渣，由于其纤维 并放入１条１１ｃｍ×６ｃｍ滤纸条。（６）发酵培养基：１０００ｍＬ 质含量较高，一般不宜直接作为饲料，如不加以合理利用将造 木薯酒糟液，４ｇ（ＮＨ）ＳＯ，２ｇＫＨＰＯ，０．５ｇＭｇＳＯ · ４ ２ ４ ２ ４ ４ ［４］ 成资源浪费 。新鲜木薯酒糟液具有高温、湿热和偏酸的特 ７ＨＯ，０．５ｇＭｎＳＯ，ｐＨ值４．０～５．０。比较不同碳源培养基 ２ ４ 点，因此，利用木薯酒糟液培养耐热真菌生产高温纤维素酶具 发酵效果时，分别用４０ｇ稻草或４０ｇ麸皮加９６０ｍＬ蒸馏水 有潜在的经济价值。本研究报道了１株从土壤中筛选的产高