端粒结合蛋白在煤焦沥青烟提取物致人支气管上皮细胞恶变中作用答辩幻灯.pptVIP

端粒结合蛋白在煤焦沥青烟提取物致人支气管上皮细胞恶变中的作用? 硕士研究生： 李小龙导 师 ： 吴逸明 教 授 王 威 副教授 主要内容 引言 材料与方法 结果 结论 致谢 引言 煤焦沥青已被世界卫生组织确定为明确的人类致癌物，但其致癌机制尚不十分清楚。 研究已发现绝大部分肿瘤细胞的端粒缩短，端粒酶活性增强，保持端粒的稳定是防止细胞癌变的一个重要步骤。 端粒是真核细胞染色体末端非编码DNA重复序列和与之相连的端粒结合蛋白的功能性复合体，端粒过度消耗或者结构破坏导致其功能障碍可引起细胞发生癌变。 该课题组已发现中温煤焦沥青烟可致BEAS-2B细胞端粒DNA相对长度缩短、端粒酶活力增高、POT1与TRF1的mRNA及蛋白表达下调、TRF2的mRNA及蛋白表达上调。 该研究通过RNA干扰技术分别抑制POT1和hTERT基因表达来观察煤焦沥青烟染毒BEAS-2B细胞的端粒结合蛋白TRF1、TRF2、POT1和hTERT的mRNA表达与蛋白表达等，分析他们在细胞恶变中的作用。 材料与方法 永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B。 中温煤焦沥青烟 短发夹RNA（shRNA）表达载体 溶解250mg中温煤焦沥青烟提取物于二甲基亚砜(DMSO) 50ml中，使用时培养液稀释至1.88mg/ml染毒。