叶黄素软胶囊中叶黄素含量的高效液相色谱法测定.docVIP

精品论文 参考文献 叶黄素软胶囊中叶黄素含量的高效液相色谱法测定 邓丽蕴 （湖南师范大学化学化工学院 2010级 湖南长沙 410081） 【摘要】 为建立高效液相色谱法测定叶黄素软胶囊中叶黄素含量的方法。叶黄素软胶囊样品的内容物用丙酮提取，定容，一定量溶液经氮气吹干，用95%乙醇复溶后经C18柱分离，高效液相色谱紫外检测器于446 nm处检测，外标法定量。叶黄素标准溶液在0.37 ～ 23.52 micro;g/mL 范围内，有良好的线性关系（r=0.9997）,软胶囊样品中叶黄素的平均百分含量为1.12%。该方法简便准确，重现性好，可用于药品中叶黄素含量的测定。 【关键词】 叶黄素 叶黄素软胶囊 高效液相色谱法 【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2013）23-0330-02 1 引言　 叶黄素是一种天然色素，广泛存在于植物的叶、花、果实和藻类生物中[1]。作为一种含氧类类胡萝卜素，天然叶黄素是性能优良的抗氧化剂，在老年性黄斑退化病[2]和白内障[3]等疾病的防治方面具有重要的作用。医学研究表明，叶黄素可以在一定程度上抵御游离基对人体细胞和器官的损伤，有效的保护视力[4]，预防动脉硬化，增强免疫力[5]，降低癌症的发病率[6]。 高效液相色谱法（HPLC）是目前测定叶黄素含量的常用手段之一[7]。该方法以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析[8]。高效液相色谱法测定叶黄素含量操作简便[9]，结果准确，重复性好[10]。 2 实验部分 2.1 实验试剂与仪器 2.1.1 实验主要试剂 甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、95%乙醇、蒸馏水（过膜处理）、叶黄素标准溶液（92 mu;g/mL） 2.1.2 实验主要仪器 岛津LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司） 岛津液相色谱工作站（日本岛津公司） AL204型电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超生仪器有限公司） SHZ-Ⅲ型循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂） 50 mL容量瓶 2.2 实验方法与结果 2.2.1 样品胶囊内容物的溶解提取 随机选取3-4粒叶黄素软胶囊样品，提取胶囊内容物，混匀，用电子天平称取0.208 g内容物至100 mL的容量瓶中，加入适量丙酮，避光条件下超声振荡30 min ,冷却后定容，摇匀。取该溶液2mL于10 mL PP管中，用氮气流将丙酮吹干，加入4 mL 95%乙醇复溶，所得溶液过膜，贴标签避光保存。 2.2.2 高效液相色谱条件的确定 色谱柱：C18（250 mm 4.6 mm, 5mu;m）；流动相：甲醇：乙腈=10:90； 流速：1 mL/min；检测波长：446 nm；进样量：5 mu;L；柱温：29 ℃ 2.2.3 叶黄素标准曲线的测定 分别从叶黄素标准液（92mu;g/mL）中移取0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mL于25 mL容量瓶，加95%乙醇定容，摇匀。在规定的色谱条件下进行测定，所得数据如表1所示。 表1. 叶黄素含量标准曲线测定实验数据 标准溶液浓度c (mu;g /mL) 峰面积A 0.37 26669.43 0.74 56098.68 1.47 115005.25 2.94 232818.40 5.88 468444.70 11.76 939697.30 23.52 1882202.50 以峰面积A对浓度c（mu;g/mL）建立标准曲线，如图1所示。回归方程为A=80144.05254c-2792.42346，其相关系数r=0.9997。由