禾谷孢菌生质体的制备和再生研究-南京师范大学学报自然科学版.PDF

第 !- 卷第 ( 期 南京师大学报（自然科学版） VJA ,!- CJ , ( 年 （ ） !( QGRSC9 G5 CCQTCU CGS=9 RCTVWS.TXY C2I@B2A ./?4K/4 !( !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 禾谷镰孢菌原生质体的制备和再生研究 林玲，史建荣，陈怀谷，石志琦，王裕中 （江苏省农业科学院植物保护研究所，南京， ） !((- ［摘要］ 为建立禾谷镰孢菌（ ）转化体系，选用禾谷镰孢菌株 为受体，分别用 !#$%’ (%$’)*$%’ ./01234 5(!’ 裂解酶、蜗牛酶、崩溃酶、纤维素酶、几丁质酶消化该菌细胞壁，都可获得一定数量的原生质体 , 其中产生原生质 体效率最高的是崩溃酶，而且以6 78 9 浓度产生的原生质体数量最多，消化 ) ,6 : - ,6 0 即可获得相当数量的原生 质体 菌量的加入以每毫升酶解液中加入 湿菌丝产生的原生质体最多 所制备出的原生质体的再生方式 , ! ;7 , 至少有 种 ! , ［关键词］ 禾谷镰孢菌；原生质体制备；再生 ［中图分类号］ ； ［文献标识码］； ［文章编号］ （ ） #) ))6 (( -*(* !( ( ’’ - ! ! ! ! ! 引言 对病原菌基因表达系统的研究是探讨植物病原菌的致病机制，寻求控制植物病害的有效 ［，］ 途径 ( ! , 近年来对植物病原菌的遗传转化研究已取得较大进展，其中，有关病原菌原生质体 ［］ 的制备和再生技术是进行遗传转化的关键 ) 禾谷镰孢菌（ ）是小 , !#$%’ (%$’)*$%’ ./01234 麦赤霉病的病原菌，而小麦赤霉病是影响我国长江中下游、东北麦区以及世界其他温暖潮湿地 区重要的灾变性病害, 近年来，在欧美等国家小麦赤霉病发生严重，研究小麦赤霉病的致病机 理以及病害防治已成为一个热点 现有的关于小麦赤霉病菌致病机理的报道还不多，为了进行 , 禾谷镰孢菌致病性相关基因的研究，我们对禾谷镰孢菌原生质体的制备方法与条件以及原生 质体再生等方面进行了研究, 材料和方法 # 供试菌株 禾谷镰孢菌株 5(!’，由江苏省农业科学院植物保护研究所保存 , #$ 培养基 产孢培养基：绿豆汤（ ） - 78 9 , ［］ 液体培养基： ，参考 等的方法 - ，配方为葡萄糖 ， ， =4?@; =?AA4B ! 78 9 C+ DA ) 78 9 E+