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第35卷 第4期 南京林业大学学报 (自然科学版) Vo1.35.No.4
2011年7月 JournalofNanjingForestryUniversity(NaturalScienceEdition) Ju1.,2011
http://www.nldxb.corn[doi:10.3969/j.issn.1000—2006.2011.04.023]
纤维素酶液中I3}一葡萄糖苷酶的分离纯化
宋娜娜,宋向阳 ,连之娜,勇 强,余世袁
(南京林业大学化学工程学院,林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,江苏 南京 210037)
摘要:通过 (NH ):SO 分级沉淀、HiPrep26/10Desahing脱盐柱、Sourcel5Q 阴离子交换柱、
Source15S阳离子交换柱、HiTrap16/60SephacrylS-200HR凝胶过滤等技术,分离纯化 3种来
源里氏木霉、黑曲霉、里氏木霉与黑曲霉混合纤维素酶液中的31一葡萄糖苷酶。结果表明,经
SDS.PAGE电泳鉴定均为电泳纯,测得黑氏木霉、黑曲霉单独培养B一葡萄糖苷酶相对分子质量
分别为68、129ku,而混合菌培养分离得到两种 B~葡萄糖苷酶分子质量大小分别为66.2、
134ku。与单独培养的p一葡萄糖苷酶相似。3种来源的p一葡萄糖苷酶经多步分离纯化后的
纯化倍数分别为37.25、40.21、30.12,酶活回收率分别为20.12%、23.21%、28.56%。
关键词:里氏木霉;黑曲霉;纤维素酶;p一葡萄糖苷酶;分离纯化
中图分类号:Q814 文献标志码 :A 文章编号:1000—2006(2011)04—0111—06
IsolationandpurificationofI3;一glucosidasefrom cellulasesolution
SONGNana,SONGXiangyang ,LIANZhina,YONGQiang,YUShiyuan
(KeyLaboratoryofForestGenetics Biotechnology,MinistryofEducation;CollegeofChemicalEngineering,
NanjingForestryUniversity,Nanjing,210037,China)
Abstract:The13-glueosidasewereseparatedandpurifiedfromcellulasesolutionsproducedbyTriehodermareesei,Asper—
gillusniger,andmixedenzymesof reeseiandA.nigerthrough (NH4)2SO4rfactionalprecipitation,HiPrep26/10
gelfiltration,Source15Qandsource15Sion—exchangecolumns,andHiTrep16/60SephacrylS-200HRgelcolumn.
BothB一1,4-glueosidaseshowedapparenthomogeneityinSDS—PAGE.Theestimatedmolecularmassesof13—1,4-glucosi—
dasewere68and129 kurfom reeseiandA.niger.respectively.Twokindsof3-glucosidaseswerepurifiedfrom
mixedcultureof reeseandA.niger.twosinglesuhunitmolecularmasseswereabout134 kuand66.2kuwhichare
similartothesingleculture.Threesourcesof31-GAthroughmulti—steppurificationthepurificationmultiplewere37.25,
40.21.3O.12respectively.Therec
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